Μετάβαση στο περιεχόμενο
FRTL
Ιστός
Thyroidea
Συνώνυμα
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Έγγραφα

FRTL

Cell line · Αριθμός προϊόντος 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) είναι μια συνεχής σειρά θυλακικών κυττάρων θυρεοειδούς αρουραίου που έχουν καλλιεργηθεί για τη μελέτη διαφόρων πτυχών της φυσιολογίας και της παθολογίας του θυρεοειδούς. Τα κύτταρα αυτά είναι ιδιαίτερα αξιοσημείωτα για την ικανότητά τους να συσσωρεύουν ενδοκυτταρικά ιώδιο, ένα βασικό χαρακτηριστικό που αντανακλά τη λειτουργία του θυρεοειδούς in vivo. Αυτό το μοναδικό χαρακτηριστικό τα καθιστά κατάλληλα για έρευνα που επικεντρώνεται στη βιοσύνθεση των θυρεοειδικών ορμονών, στο μηχανισμό μεταφοράς ιωδίου και στις επιδράσεις διαφόρων ουσιών στη λειτουργία του θυρεοειδούς.

Οι συνθήκες καλλιέργειας για τα κύτταρα FRTL είναι αρκετά ειδικές, απαιτώντας ένα εξειδικευμένο μέσο για τη διατήρηση των φυσιολογικών ιδιοτήτων τους. Συμπληρώματα όπως FBS, ινσουλίνη, υδροκορτιζόνη, θυρεοτροπίνη, τρανσφερρίνη, σωματοστατίνη και οξική γλυκυλ-1-ιστιδυλο-λυσίνη είναι απαραίτητα για την αναπαραγωγή του ορμονικού περιβάλλοντος του θυρεοειδούς αδένα. Αυτός ο ακριβής συνδυασμός συνθηκών υποστηρίζει το τυπικό πρότυπο ανάπτυξης των κυττάρων, όπου τείνουν να συσσωρεύονται το ένα πάνω στο άλλο και να σχηματίζουν τρισδιάστατες δομές αντί να εξαπλώνονται ως μονοστρωματικό στρώμα. Αυτή η συμπεριφορά συσσώρευσης είναι σημαντική καθώς μιμείται τη θυλακική διάταξη που συναντάται στον φυσικό θυρεοειδικό ιστό, παρέχοντας έτσι ένα ακριβέστερο μοντέλο για τη μελέτη των αλληλεπιδράσεων και της δυναμικής των θυρεοειδικών κυττάρων σε ελεγχόμενο περιβάλλον.

Ιστός
Thyroidea
Συνώνυμα
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Αρουραίος
Σεξ
Μη καθορισμένο
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Ογκογόνος
Όχι
Καρυότυπος
Διπλοειδής
Χρόνος διπλασιασμού
5-7 ημέρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
FRTL (αριθμός καταλόγου Cytion 500202)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10116
Κελλοσαύρος
CVCL_5753

05Έκφραση και ευαισθησία

Προϊόντα
Θυροσφαιρίνη

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
Ham's F12, w: 1,0 mM σταθερή γλουταμίνη, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,1 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820600a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 0,5% FBS, 10 mg/L ινσουλίνη, 5 mg/L τρανσφερρίνη, 50 μικρογραμμάρια/L υδροκορτιζόνη, 10 μικρογραμμάρια/L σωματοστατίνη, 10 μικρογραμμάρια/L Gly-His-Lsy-acetate, 0,0165 μικρογραμμάρια/mL TSH βοοειδών (αριθμός καταλόγου T1614 από Scripps Laboratories) - Προσθέστε την απαιτούμενη TSH λίγο πριν από τη χρήση και αποστειρώστε το φίλτρο στο μέσο.
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Ανανέωση υγρών
3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 48 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
Fischer
Ηλικία δωρητή
6 εβδομάδες