Pāriet uz saturu
FRTL
Audums
Thyroidea
Sinonīmi
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Dokumenti

FRTL

Cell line · Preces numurs 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) šūnas ir nepārtraukta žurku vairogdziedzera folikulāro šūnu līnija, kas kultivēta, lai pētītu dažādus vairogdziedzera fizioloģijas un patoloģijas aspektus. Šīs šūnas īpaši izceļas ar spēju uzkrāt jodīdu intracelulāri, kas ir galvenā vairogdziedzera funkciju in vivo raksturojoša pazīme. Šī unikālā īpašība padara tās piemērotas pētījumiem, kas vērsti uz vairogdziedzera hormonu biosintēzi, jodīdu transporta mehānismu un dažādu vielu ietekmi uz vairogdziedzera darbību.

FRTL šūnu kultivēšanas apstākļi ir diezgan specifiski, un to fizioloģisko īpašību saglabāšanai nepieciešama specializēta barotne. Lai atkārtotu vairogdziedzera hormonālo vidi, nepieciešamas tādas piedevas kā FBS, insulīns, hidrokortizons, tirotropīns, transferīns, somatostatīns un glicil-1-histidil-lizīna acetāts. Šī precīzā apstākļu kombinācija atbalsta šūnu tipisko augšanas modeli, kad tās sliecas salikties viena uz otras un veidot trīsdimensiju struktūras, nevis izkliedēties kā monoslānī. Šāda grupēšanās ir nozīmīga, jo tā atdarina dabiskajos vairogdziedzera audos sastopamo folikulāro izvietojumu, tādējādi nodrošinot precīzāku modeli vairogdziedzera šūnu mijiedarbības un dinamikas izpētei kontrolētā vidē.

Audums
Thyroidea
Sinonīmi
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Klasifikācija

Organisms
Žurka
Sekss
Nav norādīts
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Tumorogēns
Nē
Kariotips
Diploīds
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
5-7 dienas

04Identifikatori

Atsauce
FRTL (Cytion kataloga numurs 500202)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Pazīmes un uzņēmība

Produkti
Tiroglobulīns

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
Hama F12, w: 1,0 mM stabils glutamīns, w: 1,0 mM nātrija piruvāts, w: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820600a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildiniet barotni ar 0,5 % FBS, 10 mg/l insulīna, 5 mg/l transferīna, 50 mikrogramu/l hidrokortizona, 10 mikrogramu/l somatostatīna, 10 mikrogramu/l gli-His-Lsy-acetāta, 0,0165 mikrogramu/ml liellopu TSH (kataloga numurs T1614 no Scripps Laboratories) - Pievienojiet nepieciešamo TSH tieši pirms lietošanas un sterili filtrējiet barotnē.
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 48 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
Fischer
Donora vecums
6 nedēļas