Gå til innholdet
FRTL
Vev
Thyroidea
Synonymer
FRT-L, FR-TL, Fischer Rat Thyroid in Low-serum

Dokumenter

FRTL

Cell line · Produktnummer 500202

FRTL (Fischer Rat Thyroid Low Serum) cells are a continuous line of rat thyroid follicular cells that have been cultured to study various aspects of thyro...

€800.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

FRTL-celler (Fischer Rat Thyroid Low Serum) er en kontinuerlig linje av follikulære skjoldbruskkjertelceller fra rotter som har blitt dyrket for å studere ulike aspekter av skjoldbruskkjertelfysiologi og -patologi. Disse cellene er spesielt kjent for sin evne til å akkumulere jodid intracellulært, en nøkkelegenskap som gjenspeiler skjoldbruskkjertelfunksjonen in vivo. Denne unike egenskapen gjør dem egnet for forskning på biosyntesen av skjoldbruskkjertelhormoner, mekanismen for jodidtransport og effekten av ulike stoffer på skjoldbruskkjertelfunksjonen.

FRTL-cellene må dyrkes under ganske spesielle forhold, og det kreves et spesialisert medium for å opprettholde deres fysiologiske egenskaper. Tilsetninger som FBS, insulin, hydrokortison, tyrotropin, transferrin, somatostatin og glycyl-1-histidyl-lysinacetat er nødvendige for å gjenskape det hormonelle miljøet i skjoldbruskkjertelen. Denne presise kombinasjonen av forhold støtter cellenes typiske vekstmønster, der de har en tendens til å stable seg på hverandre og danne tredimensjonale strukturer i stedet for å spre seg som et monolag. Denne klyngeatferden er viktig fordi den etterligner det follikulære arrangementet som finnes i naturlig skjoldbruskkjertelvev, og gir dermed en mer nøyaktig modell for å studere skjoldbruskkjertelcelleinteraksjoner og -dynamikk i en kontrollert setting.

Vev
Thyroidea
Synonymer
  • FRT-L
  • FR-TL
  • Fischer Rat Thyroid in Low-serum

02Klassifisering

Organisme
Rotte
Sex
Uspesifisert
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Tumorinduserende
Nei
Karyotype
Diploid
Fordoblingstid
5-7 dager

04Identifikatorer

Kildehenvisning
FRTL (Cytion-katalognummer 500202)
NCBI-skattenummer
10116
Cellosaurus
CVCL_5753

05Uttrykk og mottakelighet

Produkter
Tyroglobulin

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
Ham's F12, m: 1,0 mM stabil glutamin, m: 1,0 mM natriumpyruvat, m: 1,1 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820600a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett mediet med 0,5 % FBS, 10 mg/L insulin, 5 mg/L transferrin, 50 mikrogram/L hydrokortison, 10 mikrogram/L somatostatin, 10 mikrogram/L gly-His-Lsy-acetat, 0,0165 mikrogram/mL bovint TSH (katalognummer T1614 fra Scripps Laboratories) - Tilsett den nødvendige mengden TSH rett før bruk og sterilfiltrer i mediet.
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 48 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
Fischer
Donorens alder
6 uker