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MIA PaCa-2
Gewebe
Bauchspeicheldrüse
Krankheit
Duktales Adenokarzinom
Synonyme
MIA-PaCa-2, MIA-PACA-2, MIA-Pa-Ca-2, MIA Paca2, MIA PaCa2, MiaPaCa-2, MIAPACA-2, MiaPaca.2, MiaPaCa2, Miapaca2, MIAPaCa2, MIAPACA2, Mia PACA 2, MIAPaCa-2, PaCa2

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MIA PaCa-2

Cell line · Artikelnummer 300438

The MIA PaCa-2 cell line is an indispensable asset in the field of cancer research and was derived from the pancreatic carcinoma tissue of a 65-year-old m...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die MIA-PaCa-2-Zelllinie ist ein unverzichtbarer Aktivposten auf dem Gebiet der Krebsforschung und wurde aus dem Pankreaskarzinomgewebe eines 65-jährigen Mannes gewonnen. Mia-PaCa-2-Zellen werden häufig zur Erforschung des duktalen Pankreas-Adenokarzinoms (PDAC) verwendet, einer notorisch aggressiven und tödlichen Krebsart. Die Zelllinie bietet ein solides Tumormodell, das die zellulären Eigenschaften von PDAC widerspiegelt. Eine der wichtigsten Eigenschaften dieser Zelllinie ist ihr genetisches Profil, das Mutationen in kritischen Genen wie KRAS und TP53 enthält, die für die genetische Landschaft von Patienten mit Bauchspeicheldrüsenkrebs typisch sind.

Die Zellen wurden ausgiebig genutzt, um verschiedene Aspekte des Wachstums von Bauchspeicheldrüsenkrebs, der Metastasierung und der Resistenz gegen Therapeutika zu untersuchen. Mia Paca-2-Zellen sind ein wichtiges Instrument zur Beurteilung der Wirksamkeit von Chemotherapeutika. Darüber hinaus dient die Zelllinie als wichtige Ressource für die Erforschung der Signalwege, die für das Überleben und die Metastasierung von Krebszellen entscheidend sind, darunter die MAPK-, PI3K/AKT- und Wnt-Signalwege. Studien mit MIA PaCa-2-Zellen haben auch die dynamischen Wechselwirkungen zwischen Krebszellen und ihrer Mikroumgebung beleuchtet. Das robuste In-vitro-Wachstum von MIA PaCa-2 und seine Fähigkeit, in Xenotransplantationsmodellen Tumore zu bilden, machen es besonders geeignet für die Untersuchung des Krebsfortschritts und der Mechanismen der Tumorentstehung.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die Mia Paca-2-Zelllinie mit ihrer breiten Anwendung in der Bauchspeicheldrüsenkrebsforschung weiterhin eine wichtige Ressource für Wissenschaftler weltweit darstellt.

Gewebe
Bauchspeicheldrüse
Krankheit
Duktales Adenokarzinom
Synonyme
  • MIA-PaCa-2
  • MIA-PACA-2
  • MIA-Pa-Ca-2
  • MIA Paca2
  • MIA PaCa2
  • MiaPaCa-2
  • MIAPACA-2
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  • MIAPaCa-2
  • PaCa2

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Tumorauslösend
Wachstum in weichem Agar. Bildung von progressiv wachsenden Karzinomen in athymischen Nacktmäusen.
Karyotyp
Hypotriploid
Verdopplungszeit
25 bis 40 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
MIA PaCa-2 (Cytion-Katalognummer 300438)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0428

05Expression und Anfälligkeit

Isoenzyme
G6PD, B
Mutationsprofil
Homozygot für KRAS p.Gly12Cys (c.34G>T) Homozygot für CDKN2A-Deletion

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Nach dem Auftauen die Zellen mit einer Dichte von 2 bis 5 x 104 Zellen/cm² ausplattieren und die Zellen mindestens 24 Stunden lang vom Gefrierprozess erholen lassen und anhaften lassen.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
65 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch