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MIA PaCa-2
Tecido
Pâncreas
Doença
Adenocarcinoma ductal
Sinónimos
MIA-PaCa-2, MIA-PACA-2, MIA-Pa-Ca-2, MIA Paca2, MIA PaCa2, MiaPaCa-2, MIAPACA-2, MiaPaca.2, MiaPaCa2, Miapaca2, MIAPaCa2, MIAPACA2, Mia PACA 2, MIAPaCa-2, PaCa2

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MIA PaCa-2

Cell line · Número do produto 300438

The MIA PaCa-2 cell line is an indispensable asset in the field of cancer research and was derived from the pancreatic carcinoma tissue of a 65-year-old m...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular MIA PaCa-2 é um recurso indispensável no domínio da investigação do cancro e foi obtida a partir do tecido do carcinoma pancreático de um homem de 65 anos. As células Mia PaCa 2 são amplamente utilizadas no estudo do adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC), um tipo de cancro notoriamente agressivo e letal. A linha celular oferece um modelo de tumor sólido que reflecte as caraterísticas celulares do PDAC. Um dos principais atributos desta linha celular é o seu perfil genético, que inclui mutações em genes críticos como o KRAS e o TP53, que são emblemáticos da paisagem genética observada em doentes com cancro pancreático.

As células têm sido amplamente utilizadas para investigar vários aspectos do crescimento do cancro pancreático, metástases e resistência à terapêutica. As células Mia Paca-2 são fundamentais para avaliar a eficácia dos fármacos quimioterapêuticos. Além disso, esta linha celular constitui um recurso vital para a investigação das vias de sinalização essenciais para a sobrevivência das células cancerígenas e para as metástases, incluindo as vias MAPK, PI3K/AKT e Wnt. Os estudos que utilizam as células MIA PaCa-2 também lançaram luz sobre as interações dinâmicas entre as células cancerígenas e o seu microambiente. O crescimento robusto in vitro da MIA PaCa-2 e a sua capacidade de formar tumores em modelos de xenoenxertos tornam-na particularmente adequada para examinar a progressão do cancro e os mecanismos da tumorigénese.

Em resumo, a linha celular Mia Paca-2, com a sua vasta aplicação na investigação do cancro pancreático, continua a ser um recurso fundamental para os cientistas de todo o mundo.

Tecido
Pâncreas
Doença
Adenocarcinoma ductal
Sinónimos
  • MIA-PaCa-2
  • MIA-PACA-2
  • MIA-Pa-Ca-2
  • MIA Paca2
  • MIA PaCa2
  • MiaPaCa-2
  • MIAPACA-2
  • MiaPaca.2
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  • Miapaca2
  • MIAPaCa2
  • MIAPACA2
  • Mia PACA 2
  • MIAPaCa-2
  • PaCa2

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Crescimento em ágar mole. Formação de carcinomas de crescimento progressivo em ratinhos atímicos nus.
Cariótipo
Hipotriplóide
Tempo de duplicação
25 a 40 horas

04Identificadores

Referência
MIA PaCa-2 (número de catálogo Cytion 300438)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0428

05Expressão e suscetibilidade

Isoenzimas
G6PD, B
Perfil mutacional
Homozigótico para KRAS p.Gly12Cys (c.34G>T) Homozigótico para deleção de CDKN2A

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 2 a 5 x 104 células/cm2 e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
65 anos
Etnia
Caucasiano