Pāriet uz saturu
MIA PaCa-2
Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Duktālā adenokarcinoma
Sinonīmi
MIA-PaCa-2, MIA-PACA-2, MIA-Pa-Ca-2, MIA Paca2, MIA PaCa2, MiaPaCa-2, MIAPACA-2, MiaPaca.2, MiaPaCa2, Miapaca2, MIAPaCa2, MIAPACA2, Mia PACA 2, MIAPaCa-2, PaCa2

Dokumenti

MIA PaCa-2

Cell line · Preces numurs 300438

The MIA PaCa-2 cell line is an indispensable asset in the field of cancer research and was derived from the pancreatic carcinoma tissue of a 65-year-old m...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MIA PaCa-2 šūnu līnija ir neaizstājama vēža izpētes jomā, un tā tika iegūta no 65 gadus veca vīrieša aizkuņģa dziedzera karcinomas audiem. Mia PaCa 2 šūnas tiek plaši izmantotas aizkuņģa dziedzera duktālās adenokarcinomas (PDAC), kas ir bēdīgi slavens agresīvs un nāvējošs vēža veids, pētījumos. Šūnu līnija piedāvā solīdu audzēja modeli, kas atspoguļo PDAC šūnu īpašības. Viena no šīs šūnu līnijas galvenajām īpašībām ir tās ģenētiskais profils, kas ietver mutācijas tādos kritiskos gēnos kā KRAS un TP53, kas raksturo aizkuņģa dziedzera vēža pacientiem novēroto ģenētisko ainavu.

Šūnas ir plaši izmantotas, lai pētītu dažādus aizkuņģa dziedzera vēža augšanas, metastāžu un rezistences pret terapiju aspektus. Mia Paca-2 šūnas ir noderīgas ķīmijterapeitisko zāļu efektivitātes novērtēšanā. Turklāt šī šūnu līnija kalpo kā būtisks resurss, lai pētītu signālu ceļus, kas ir būtiski vēža šūnu izdzīvošanai un metastāžu veidošanai, tostarp MAPK, PI3K/AKT un Wnt ceļus. Pētījumi, kuros izmantotas MIA PaCa-2 šūnas, ir arī atklājuši dinamisko mijiedarbību starp vēža šūnām un to mikrovidi. MIA PaCa-2 šūnu spēcīgā in vitro augšana un spēja veidot audzējus ksenopaugu modeļos padara tās īpaši piemērotas vēža progresēšanas un audzēju rašanās mehānismu izpētei.

Kopumā Mia Paca-2 šūnu līnija ar tās plašo pielietojumu aizkuņģa dziedzera vēža pētniecībā joprojām ir ļoti svarīgs resurss zinātniekiem visā pasaulē.

Audums
Aizkuņģa dziedzeris
Slimība
Duktālā adenokarcinoma
Sinonīmi
  • MIA-PaCa-2
  • MIA-PACA-2
  • MIA-Pa-Ca-2
  • MIA Paca2
  • MIA PaCa2
  • MiaPaCa-2
  • MIAPACA-2
  • MiaPaca.2
  • MiaPaCa2
  • Miapaca2
  • MIAPaCa2
  • MIAPACA2
  • Mia PACA 2
  • MIAPaCa-2
  • PaCa2

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Izaugsme mīkstajā agārā. Pakāpeniski augošu karcinomu veidošanās nude atimiskām pelēm.
Kariotips
Hipotriploīds
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
25 līdz 40 stundas

04Identifikatori

Atsauce
MIA PaCa-2 (Cytion kataloga numurs 300438)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0428

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
G6PD, B
Mutāciju profils
Homozigotam ar KRAS p.Gly12Cys (c.34G>T) Homozigotam ar CDKN2A deleciju

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Pēc atkausēšanas izkliedējiet šūnas uz šķīvja ar blīvumu 2 līdz 5 x 104 šūnas/cm2 un ļaujiet šūnām atgūties no sasaldēšanas procesa un pielipt vismaz 24 stundas.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
65 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis