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Accutase Cell Detachment Solution - 100 ml

Accutase Cell Detachment Solution with EDTA and Phenol Red – 100 ml Accutase is a ready-to-use, sterile-filtered cell detachment solution designed as a gentle alternative to trypsin/EDTA for dissociating adherent mammalian cells from standard tissue culture plasticware and adhesion-coated surfaces. It combines proteolytic and collagenolytic enzyme activity in a balanced salt solution to deliver effective yet controlled dissociation, preserving cell-surface proteins and supporting high post-passage viability and rapid reattachment. The Accutase formulation is based on Dulbecco’s phosphate-buffered saline (DPBS) with EDTA and phenol red as a visual pH indicator. The enzymes are of non-mammalian and non-bacterial origin, making Accutase particularly well suited to stem cell research, vaccine workflows, and any application where animal- or microbially-derived contaminants must be minimised. The solution auto-inhibits at 37 °C, so no neutralising reagent or serum-containing medium is required after detachment – cells can be transferred directly into fresh medium. Key Features • Ready-to-use 1x sterile-filtered liquid – no dilution or reconstitution required • Combined proteolytic and collagenolytic enzyme activity for gentle dissociation • Each batch standardised to a defined dissociation activity for lot-to-lot consistency • Non-mammalian and non-bacterial enzyme origin • Auto-inhibits at 37 °C – no neutralising solution needed • Formulated in Dulbecco’s PBS with EDTA • Phenol red included as visual pH indicator • pH 6.8 – 7.8 Typical Applications Accutase gently dissociates a wide variety of adherent and sensitive cell types, including human embryonic stem cells (hESCs), human induced pluripotent stem cells (iPSCs), neural stem cells, primary neurons, and routinely cultured adherent lines such as HeLa, HEK 293, CHO, MDCK, Vero, NIH/3T3, BHK-21 and A549. Typical use cases include: • Routine subculture and passaging of adherent mammalian cells • Gentle single-cell dissociation of hESCs, iPSCs and other sensitive lines • Sample preparation for flow cytometry and FACS analysis • Analysis of cell-surface markers where epitope integrity matters • Cell migration, proliferation and apoptosis assays • Quiescence assays by serum starvation and oncogene transfection studies • Tumor cell and neural crest cell migration assays • Production scale-up in bioreactor workflows For routine work, apply approximately 10 ml of Accutase per 75 cm2 of culture surface and incubate for 5–10 minutes at room temperature. The optimal incubation time should be determined for each cell line and should not exceed one hour. Prior to addition, rinse the cell layer with a Ca2+/Mg2+-free salt solution such as DPBS without calcium and magnesium to remove residual serum and divalent cations. Handling & Storage Store the unopened bottle frozen at -15 °C or below. Thaw either at room temperature or overnight at +2 °C to +8 °C. Do not thaw Accutase in a 37 °C water bath, as elevated temperatures reduce enzyme activity. After thawing, the solution can be stored for up to 2 months at +2 °C to +8 °C; do not store at room temperature. Do not pre-warm the reagent to 37 °C before application – add it directly to washed cells at room temperature. For long-term shelf life, single-use aliquoting is recommended to avoid repeated thaw cycles. Always work under aseptic conditions. Quality Manufactured under strict quality standards. Each batch of Accutase is sterile-filtered and tested for sterility, pH, appearance and dissociation activity to ensure consistent, reproducible performance from lot to lot. Product Specifications Specification Detail Product typeCell detachment / dissociation reagent FormatSterile-filtered liquid, ready-to-use Volume100 ml Working concentration1x (ready-to-use) Enzyme activityCombined proteolytic and collagenolytic Enzyme originNon-mammalian and non-bacterial Buffer systemDulbecco’s PBS with EDTA pH indicatorPhenol red pH range6.8 – 7.8 AppearanceClear, pale red to orange solution Storage temperature-15 °C or below Stability after thawingUp to 2 months at +2 °C to +8 °C Recommended use volume~10 ml per 75 cm2 culture surface Typical incubation time5 – 10 minutes at room temperature Shipping conditionsFrozen on dry ice Intended useFor research use and further manufacturing only Formulation (Composition per Liter) Accutase is a registered trademark of Innovative Cell Technologies, Inc.

€75.00

hors taxes et frais de port

Accutase Cell Detachment Solution - 500 ml

€310.00

hors taxes et frais de port

Cytion Endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850006

Milieu de culture avancé pour cellules endothéliales

Le milieu de culture avancé pour cellules endothéliales est utilisé pour la culture de cellules endothéliales humaines issues de gros vaisseaux. Des facteurs de croissance recombinants humains définis, notamment le VEGF et l’IGF-1 Long R3, remplacent le supplément de croissance brut pour cellules endothéliales. Le milieu complet contient du sérum fœtal de veau, de la L-glutamine, de l’héparine, de l’EGF, du bFGF, du VEGF, de l’IGF-1 Long R3, de l’acide ascorbique et de l’hydrocortisone. Pour une prolifération plus rapide avec une teneur en sérum plus élevée, optez pour le milieu de prolifération des cellules endothéliales. Pour une formulation sans VEGF, optez pour le milieu de croissance des cellules endothéliales. Nous proposons ce milieu sous forme de milieu de base de 500 ml, seul ou accompagné des suppléments, soit sous forme de composants individuels, soit sous forme de mélange de suppléments prémélangé. Les composants individuels permettent d’ajuster ou d’omettre certains facteurs, tandis que le « Supplement-Mix » s’ajoute en une seule étape. Le milieu de base est également disponible sans rouge de phénol dans les mêmes formats, ce qui évite toute interférence avec les mesures par fluorescence et colorimétriques, ainsi que la faible activité œstrogénique du rouge de phénol. Des suppléments sont nécessaires à l’utilisation, et les deux formats de suppléments sont également disponibles séparément. Une fois complété, le milieu complet contient 2 % de FCS (10 ml pour 500 ml de milieu de base).

€180.00

hors taxes et frais de port

Cytion Microvascular endothelial cell growth medium, advanced, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850019

Milieu de culture avancé pour cellules endothéliales microvasculaires

Le milieu de culture avancé pour cellules endothéliales microvasculaires est utilisé pour la culture de cellules endothéliales microvasculaires humaines, provenant par exemple du derme, des poumons ou du cœur. Des facteurs de croissance recombinants humains bien définis remplacent le supplément brut de croissance des cellules endothéliales. Le milieu complet contient du sérum fœtal de veau, de la L-glutamine, de l’EGF, du bFGF, du VEGF, de l’IGF-1 Long R3, de l’acide ascorbique et de l’hydrocortisone. Pour une formulation avec ECGS/H et sans VEGF, optez pour le milieu de culture pour cellules endothéliales microvasculaires. Nous proposons ce milieu sous forme de milieu de base de 500 ml, seul ou accompagné des suppléments, soit sous forme de composants individuels, soit sous forme de mélange de suppléments prémélangé. Les composants individuels permettent d’ajuster ou d’omettre certains facteurs, tandis que le mélange de suppléments s’ajoute en une seule étape. Le milieu de base est également disponible sans rouge de phénol dans les mêmes formats, ce qui évite toute interférence avec les mesures par fluorescence et colorimétriques, ainsi que la faible activité œstrogénique du rouge de phénol. Des suppléments sont nécessaires à l’utilisation, et les deux formats de suppléments sont également disponibles séparément. Une fois complété, le milieu complet contient 5 % de FCS (25 ml pour 500 ml de milieu de base).

€200.00

hors taxes et frais de port

Antibiotic/Antimycotic Solution (100x)

Volume: 100 ml Storage: ≤-15°C Sterility: Sterile-filtered Antibiotic/Antimycotic Solution (100x) is a sterile, ready-to-use concentrate designed to reduce microbial contamination risks in cell culture and related laboratory applications. This 100x solution contains a well-established combination of penicillin, streptomycin, and amphotericin B—providing broad-spectrum antimicrobial activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria, yeasts, and filamentous fungi. The formulation is suitable for use in eukaryotic cell cultures, bacterial media, and other contamination-sensitive systems, supporting clean and consistent lab operations. Application and Benefits Optimized for routine research protocols, this solution is widely used to maintain aseptic conditions in cell culture workflows. It offers reliable performance in contamination-sensitive environments, helping researchers reduce the risk of microbial overgrowth without compromising cell health or experimental reproducibility. The sterile-filtered formulation eliminates the need for additional solubilization steps, supporting streamlined media preparation and reducing variability in daily lab procedures. Usage and Compatibility To achieve standard working concentrations, dilute the solution 1:100 into your complete culture medium. The product is compatible with a broad range of mammalian cell lines and basal media. With consistent stock availability, researchers benefit from dependable supply continuity and simplified logistics planning. The solution should be stored at ≤ –15 °C and protected from repeated freeze-thaw cycles to maintain stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€45.00

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Cytion Chondrocyte growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850048

Milieu de culture pour chondrocytes

Le milieu de croissance pour chondrocytes est utilisé pour la multiplication en monocouche de chondrocytes humains et bovins, par exemple avant leur transfert vers une culture sur culot ou sur support. Nous proposons ce milieu sous forme de milieu de base de 500 ml, seul ou accompagné de compléments, soit sous forme de composants individuels, soit sous forme d’un mélange de compléments prémélangé. Les composants individuels permettent d'ajuster ou d'omettre certains facteurs, tandis que le mélange de suppléments s'ajoute en une seule étape. Le milieu de base est également disponible sans rouge de phénol dans les mêmes formats, ce qui évite toute interférence avec les mesures par fluorescence et colorimétriques, ainsi que la faible activité œstrogénique du rouge de phénol. Les suppléments sont indispensables à l’utilisation, et les deux formats de suppléments sont également disponibles séparément. Une fois complété, le milieu complet contient 10 % de FCS (50 ml pour 500 ml de milieu de base).

€310.00

hors taxes et frais de port

Cytion Defined fibroblast growth medium-maintenance, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850143

Milieu de culture défini pour le maintien des fibroblastes

Le milieu de maintenance défini pour fibroblastes est un milieu sans sérum et entièrement défini qui maintient les fibroblastes humains dans un état stable plutôt que de favoriser une prolifération rapide. Il convient aux travaux portant sur le sécrétome, la matrice extracellulaire et les tests de composés pour lesquels le sérum pourrait constituer une interférence. Ce milieu complet contient de la L-glutamine, du bFGF recombinant humain et de l’insuline recombinante humaine. Pour la prolifération des fibroblastes, optez pour le milieu de croissance des fibroblastes. Nous proposons ce milieu sous forme de milieu de base de 500 ml, seul ou accompagné de suppléments sans sérum, soit sous forme de composants individuels, soit sous forme de mélange de suppléments prémélangé. Les composants individuels permettent d’ajuster ou d’omettre certains facteurs, tandis que le « Supplement-Mix » s’ajoute en une seule étape. Les suppléments sont indispensables à l’utilisation, et les deux formats de suppléments sont également disponibles séparément.

€170.00

hors taxes et frais de port

D-Glucose Solution (Dextrose Solution), 250 g/L

Volume: 50 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered D-(+)-Glucose Solution (Dextrose Solution) is a sterile, ready-to-use supplement containing the naturally occurring sugar D-(+)-glucose, a central component of cellular metabolism. Glucose is involved in essential biological processes such as energy production, glycosylation, and the formation of glycans that contribute to cellular structure and function. Application and Benefits This glucose solution is widely used as a supplement in cell culture media and in numerous cellular and molecular biology applications. As a primary carbon and energy source, glucose supports cell growth, proliferation, and metabolic activity. Its involvement in biosynthetic pathways also makes it critical for maintaining normal cellular physiology and experimental consistency. Formulation and Usage The solution is supplied at a high concentration of 250 g/L glucose, allowing flexible dilution into culture media according to experimental requirements. It is sterile-filtered to ensure suitability for contamination-sensitive applications. Store at +2°C to +8°C and handle aseptically to maintain product quality and stability. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€32.00

hors taxes et frais de port

DMEM :F12 de Ham (1:1), p/v : 3,1 g/L de glucose, p/v : 2,5 mM de L-glutamine, p/v : 15 mM d'HEPES, p/v : 0,5 mM de pyruvate de sodium, p/v : 1,2 g/L de NaHCO₃

Le DMEM : Ham's F12 est un milieu de base largement reconnu et très utilisé en culture cellulaire pour la recherche biologique. Il constitue une source fondamentale de nutriments pour la croissance de diverses lignées cellulaires mammifères, en particulier lorsqu'il est enrichi en sérum fœtal bovin (FBS). Cette formulation unique associe le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) et le F-12 de Ham (mélange nutritif F-12 de Ham) dans un rapport précis de 1:1. L'ajout de L-glutamine enrichit encore davantage sa composition. Le DMEM, dérivé du milieu minimal essentiel d’Eagle (EMEM), offre une concentration accrue en acides aminés et en vitamines par rapport à son prédécesseur. En revanche, le milieu F-12 de Ham est basé sur le milieu F-10 de Ham, fournissant un ensemble complémentaire de composants essentiels. Pour favoriser une croissance cellulaire optimale, il est courant de compléter le DMEM:Ham's F-12 par du sérum fœtal bovin (FBS) à une concentration typique de 5 à 10 %. Cet ajout est nécessaire car le milieu est dépourvu d'hormones de croissance, de lipides et de protéines indispensables au développement cellulaire. Le DMEM:Ham's F12 intègre un système tampon de pH et est souvent enrichi en rouge de phénol, un indicateur de pH. Les cellules cultivées dans du DMEM:Ham's F12, ou dans tout milieu utilisant le système tampon au bicarbonate, nécessitent un environnement à teneur en CO₂ contrôlée comprise entre 5 et 10 % afin de maintenir des niveaux de pH appropriés. Contrôle qualité • Filtré de manière stérile Conservation et durée de conservation • Conserver entre +2 °C et +8 °C, à l’abri de la lumière. • Une fois ouvert, conserver à 4 °C et utiliser dans les 6 à 8 semaines. Conditions d’expédition • Température ambiante Conservation • Conserver au réfrigérateur entre +2 °C et +8 °C, à l’abri de la lumière. Éviter le gel et les réchauffements fréquents à +37 °C, car cela réduit la qualité du produit. • Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37 °C ni utiliser de sources de chaleur non contrôlées telles que les fours à micro-ondes. • Si seule une partie du milieu doit être utilisée, prélevez la quantité nécessaire et réchauffez-la à température ambiante avant utilisation. Composition Catégorie Composants Concentration (mg/L) Acides aminés Glycine 18,75 L-alanine 4,45 L-arginine HCl 147,50 L-asparagine H₂O 7,50 Acide L-aspartique 6,65 L-cystéine HCl H₂O 17,56 L-cystine 2 HCl 31,29 Acide L-glutamique 7,35 L-glutamine 365,00 L-histidine HCl H₂O 31,48 L-isoleucine 54,47 L-leucine 59,05 L-lysine HCl 91,25 L-méthionine 17,24 L-phénylalanine 35,48 L-proline 17,25 L-sérine 26,25 L-thréonine 53,45 L-tryptophane 9,02 L-tyrosine 2 Na 2 H₂O 55,79 L-valine 52,85 Vitamines D-biotine 0,0035 Chlorure de choline 8,98 Pantothénate de calcium D 2,24 Acide folique 2,66 Myo-inositol 12,60 Nicotinamide 2,02 Chlorhydrate de pyridoxine 0,031 Chlorhydrate de pyridoxal 2,00 Riboflavine 0,219 Chlorhydrate de thiamine 2,17 Vitamine B12 0,68 Sels inorganiques CaCl₂·2 H₂O 154,50 CuSO₄·5H₂O 0,0013 Fe(NO₃)₃·9H₂O 0,05 FeSO₄·7H₂O 0,417 KCl 311,80 MgCl₂·6 H₂O 61,20 MgSO₄·7H₂O 100,00 NaCl 6 996,00 NaHCO₃ 1 200,00 Na₂HPO₄ 71,02 NaH₂PO₄·2H₂O 70,87 ZnSO₄·7 H₂O 0,432 Autres composants D-glucose 3 151,00 Hypoxanthine 2,40 HEPES 3 574,50 Acide linoléique 0,042 Acide lipoïque 0,105 Sel de sodium du rouge de phénol 8,63 Putrescine 2 HCl 0,081 Pyruvate de sodium 55,00 Thymidine 0,365

€25.00

hors taxes et frais de port

DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium

Le DMEM (milieu de culture Eagle modifié par Dulbecco) est un milieu de base très polyvalent et largement utilisé, conçu pour favoriser la croissance d’un large éventail de cellules mammifères dans le cadre de la recherche biologique. Il constitue un milieu idéal pour la culture de fibroblastes primaires, de neurones, de cellules gliales, de cellules endothéliales veineuses humaines (HUVEC), de cellules musculaires lisses, ainsi que de lignées cellulaires courantes telles que HeLa, 293, Cos-7 et PC-12. Ce qui distingue le DMEM des autres milieux, c’est sa composition unique. Il contient une concentration en acides aminés et en vitamines quatre fois supérieure à celle du milieu minimal essentiel d’Eagle (Eagle’s Minimal Essential Medium) d’origine. Initialement développé avec une faible teneur en glucose (1 g/L) et du pyruvate de sodium, le DMEM est fréquemment utilisé avec des taux de glucose plus élevés, avec ou sans pyruvate de sodium. Il est à noter que le DMEM ne contient ni protéines, ni lipides, ni facteurs de croissance, ce qui nécessite un apport complémentaire. Pour obtenir une croissance optimale, on ajoute généralement au DMEM 10 % de sérum fœtal bovin (FBS). De plus, le DMEM utilise un système tampon à base de bicarbonate de sodium, ce qui nécessite un environnement contenant 5 à 10 % de CO₂ pour maintenir un pH physiologique. Le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) est très apprécié parmi les milieux définis destinés à la culture cellulaire et tissulaire, car il répond aux besoins de croissance de divers phénotypes de cellules adhérentes. Il surpasse le milieu d’Eagle original, développé dans les années 1950 pour la culture de cellules de poulet, grâce à une formulation enrichie connue sous le nom de « modification de Dulbecco ». Cette modification augmente considérablement la teneur en certains acides aminés et vitamines, pouvant aller jusqu’à quatre fois celle du milieu original. Dans le domaine de la culture cellulaire, le DMEM joue un rôle essentiel en tant que milieu de croissance pour différents types de cellules, notamment les cellules primaires, les cellules souches et les cellules transformées. Les chercheurs utilisent également la version modifiée du DMEM pour un large éventail d’applications de recherche, telles que la découverte de médicaments, l’ingénierie tissulaire et l’étude des voies de signalisation cellulaire. Contrôle qualité • Filtré stérile Conservation et durée de conservation • Conserver entre +2 °C et +8 °C, à l’abri de la lumière. • Une fois ouvert, conserver à 4 °C et utiliser dans les 6 à 8 semaines. Conditions d’expédition • Température ambiante Conservation • Conserver au réfrigérateur entre +2 °C et +8 °C, à l’abri de la lumière. Éviter le gel et les réchauffements fréquents à +37 °C, car cela réduit la qualité du produit. • Ne pas chauffer le milieu au-delà de 37 °C ni utiliser de sources de chaleur non contrôlées telles que les fours à micro-ondes. • Si seule une partie du milieu doit être utilisée, prélevez la quantité nécessaire et réchauffez-la à température ambiante avant utilisation. Composition Catégorie Composants Concentration (mg/L) Acides aminés Glycine 30,00 L-arginine HCl 84,00 L-cystine 2 HCl 62,57 L-glutamine 584,00 L-histidine HCl·H₂O 42,00 L-isoleucine 105,00 L-leucine 105,00 L-lysine HCl 146,00 L-méthionine 30,00 L-phénylalanine 66,00 L-sérine 42,00 L-thréonine 95,00 L-tryptophane 16,00 L-Tyrosine 2 Na 2H₂O 103,79 L-valine 94,00 Vitamines Chlorure de choline 4,00 D-pantothénate de calcium 4,00 Acide folique 4,00 Myo-inositol 7,20 Nicotinamide 4,00 Pyridoxal HCl 4,00 Riboflavine 0,40 Chlorhydrate de thiamine 4,00 Sels inorganiques CaCl₂·2 H₂O 265,00 Fe(NO₃)₃·9H₂O 0,10 KCl 400,00 MgSO₄·7H₂O 200,10 NaCl 6 400,00 NaHCO₃ 3 700,00 NaH₂PO₄·2H₂O 141,73 Autres composants D-glucose 4 500,00 Sel de sodium du rouge de phénol 15,90 Pyruvate de sodium 110,00

€25.00

hors taxes et frais de port

EMEM (MEM Eagle), p/v : 2 mM de L-glutamine, p/v : 2,2 g/L de NaHCO₃, p/v : EBSS

Le milieu minimal essentiel d'Eagle (EMEM) est l'un des milieux de base les plus couramment utilisés pour la culture d'un large éventail de cellules mammifères, en particulier les lignées cellulaires adhérentes. Développée à l’origine par Harry Eagle, cette formulation classique contient les acides aminés essentiels, les vitamines et les sels inorganiques nécessaires à la croissance des cellules primaires et des lignées cellulaires établies dans des conditions de culture standard. Cette formulation liquide prête à l’emploi et filtrée de manière stérile est enrichie en solution saline équilibrée d’Earle (EBSS), 2 mM de L-glutamine, du D-glucose (1,0 g/L) et 2,2 g/L de bicarbonate de sodium (NaHCO₃), ce qui la rend adaptée à une utilisation dans une atmosphère d’incubateur à CO₂ contrôlé (généralement 5 % de CO₂). Le rouge de phénol inclus sert d’indicateur de pH, permettant un suivi visuel pratique de l’état du milieu pendant la culture cellulaire. Caractéristiques principales • Formulation classique du MEM d’Eagle avec la solution saline équilibrée d’Earle (EBSS) • 2 mM de L-glutamine inclus – prêt à l’emploi • 2,2 g/L de bicarbonate de sodium – tamponné pour une incubation à 5 % de CO₂ • Avec du D-glucose (1,0 g/L) comme source principale de carbone • Avec du rouge de phénol comme indicateur de pH • Sans HEPES et sans pyruvate de sodium • Milieu liquide filtré stérile, prêt à l'emploi • pH 7,0 – 7,6 Applications typiques L’EMEM permet la culture d’une grande variété de lignées cellulaires mammifères, notamment HeLa, HEK 293, Vero, MRC-5, L-929, BHK-21 et de nombreuses cellules primaires. Les applications courantes comprennent : • L’entretien et la multiplication courants de lignées cellulaires adhérentes • Les processus de propagation virale et de production de vaccins • Applications de cytotoxicité et de bioessais • Études de transfection et d’expression protéique • La recherche fondamentale en biologie cellulaire et en biologie moléculaire Pour une croissance cellulaire optimale, le milieu EMEM est généralement complété par 5 à 10 % de sérum fœtal bovin (FBS) et, selon la lignée cellulaire, par des acides aminés non essentiels (NEAA) et des antibiotiques tels que la pénicilline/streptomycine. Manipulation et conservation Conserver le flacon non ouvert entre +2 °C et +8 °C, à l’abri de la lumière. Après ouverture, utiliser dans des conditions aseptiques. La L-glutamine en solution est sujette à une dégradation progressive ; nous recommandons d’utiliser le milieu dans les 4 semaines suivant son ouverture pour obtenir les meilleures performances, ou d’ajouter de la L-glutamine fraîche avant utilisation en cas de stockage prolongé. Laisser le milieu se réchauffer à 37 °C avant de l’ajouter aux cellules. Qualité Fabriqué selon des normes de qualité strictes. Chaque lot est testé pour vérifier sa stérilité, son pH, son osmolalité et ses niveaux d’endotoxines afin de garantir des performances constantes dans les applications de culture cellulaire. Caractéristiques du produit Spécifications Détails Type de produitMEM Catégorie de produitMilieux de culture cellulaire FormatLiquide StérileOui Contenance500 ml L-glutamineAvec L-glutamine (2 mM) GlucoseContient du glucose (1,0 g/L) Bicarbonate de sodiumAvec du NaHCO₃ (2,2 g/L) HEPESSans HEPES Pyruvate de sodiumSans pyruvate de sodium Rouge de phénolAvec du rouge de phénol Solution salineSolution saline équilibrée d'Earle (EBSS) pH7,0 – 7,6 Teneur en endotoxinesNon spécifiée Conditions de conservationde +2 °C à +8 °C Formulation (composition par litre)

€25.00

hors taxes et frais de port

Cytion Endothelial cell growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850176

Milieu de culture pour cellules endothéliales

Le milieu de croissance pour cellules endothéliales est le milieu standard destiné à la culture de cellules endothéliales humaines issues de gros vaisseaux, tels que la veine ombilicale, l’artère ombilicale, la veine saphène et l’aorte. Le milieu complet contient du sérum fœtal de veau, de la L-glutamine, de l’ECGS/H (supplément de croissance pour cellules endothéliales avec héparine), de l’EGF, du bFGF et de l’hydrocortisone. Pour des facteurs de croissance recombinants définis, notamment le VEGF à la place de l’ECGS/H, optez pour le milieu de culture avancé pour cellules endothéliales. Nous proposons ce milieu sous forme de milieu de base de 500 ml, seul ou accompagné des suppléments, soit sous forme de composants individuels, soit sous forme de mélange de suppléments prémélangé. Les composants individuels permettent d’ajuster ou d’omettre certains facteurs, tandis que le mélange de suppléments s’ajoute en une seule étape. Le milieu de base est également disponible sans rouge de phénol dans les mêmes formats, ce qui évite toute interférence avec les mesures par fluorescence et colorimétriques, ainsi que la faible activité œstrogénique du rouge de phénol. Des suppléments sont nécessaires à l’utilisation, et les deux formats de suppléments sont également disponibles séparément. Une fois complété, le milieu complet contient 2 % de FCS (10 ml pour 500 ml de milieu de base).

€200.00

hors taxes et frais de port

Cytion Endothelial cell proliferation medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes and vials, REF 850002

Milieu de prolifération des cellules endothéliales

Le milieu de prolifération des cellules endothéliales est conçu pour la multiplication rapide des cellules endothéliales humaines issues de gros vaisseaux, tels que la veine ombilicale, l’artère ombilicale, la veine saphène, l’aorte, les artères coronaires et pulmonaires. Le milieu complet contient du sérum fœtal de veau, de la L-glutamine, de l’héparine, de l’EGF, du bFGF, du VEGF, de l’IGF-1 Long R3, de l’acide ascorbique et de l’hydrocortisone. Pour une teneur en sérum plus faible, optez pour le milieu de croissance avancé pour cellules endothéliales. Nous proposons ce milieu sous forme de milieu de base de 500 ml, seul ou accompagné des suppléments, soit sous forme de composants individuels, soit sous forme de mélange de suppléments prémélangé. Les composants individuels permettent d’ajuster ou d’omettre certains facteurs, tandis que le mélange de suppléments s’ajoute en une seule étape. Le milieu de base est également disponible sans rouge de phénol dans les mêmes formats, ce qui évite toute interférence avec les mesures par fluorescence et colorimétriques, ainsi que la faible activité œstrogénique du rouge de phénol. Les suppléments sont indispensables à l’utilisation, et les deux formats de suppléments sont également disponibles séparément. Une fois complété, le milieu complet contient 7 % de FCS (35 ml pour 500 ml de milieu de base).

€170.00

hors taxes et frais de port

500 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS Amérique du Sud 500 ml

Issu de bovins d'Amérique du Sud, ce sérum fœtal bovin (FBS) filtré de manière stérile garantit des performances constantes en culture cellulaire. Avant sa mise sur le marché, chaque lot est soumis à des tests de stérilité, de détection des mycoplasmes et des virus bovins. De plus, chaque lot est évalué afin de vérifier sa capacité à favoriser la croissance des cellules HEK293 et CHO. Le sérum est disponible en volumes de 50 ml et 500 ml, et un certificat d'analyse (CoA) spécifique au lot peut être fourni sur demande.

€310.00

hors taxes et frais de port

50 ml bottle Fetal Bovine Serum South America Origin (FBS)

FBS South Origin 50 ml

€32.00

hors taxes et frais de port

FBS US 500 ml

Provenant des États-Unis, ce sérum fœtal bovin (FBS) filtré de manière stérile constitue une base fiable pour les applications de culture cellulaire. Chaque lot est soumis à un contrôle qualité visant à vérifier sa stérilité et à détecter la présence éventuelle de mycoplasmes et de virus bovins. De plus, chaque lot fait l'objet d'une validation biologique visant à confirmer sa capacité à favoriser la croissance des lignées cellulaires CHO et HEK293. Le sérum est conditionné en volumes de 50 ml et 500 ml. Des certificats d'analyse (CoA) spécifiques à chaque lot sont disponibles sur demande.

€506.00

hors taxes et frais de port

500 ml bottle Fetal Bovine Serum US Origin (FBS)

FBS US Origin 50 ml

€52.00

hors taxes et frais de port

Cytion Fibroblast growth medium, kit with 500 ml basal medium bottle plus supplement tubes, REF 850066

Milieu de culture pour fibroblastes

Le milieu de croissance pour fibroblastes est utilisé pour la culture de fibroblastes humains, provenant par exemple du derme ou de la gencive. Pour une culture d'entretien sans sérum dans des conditions définies, optez pour le milieu d'entretien défini pour fibroblastes. Nous proposons ce milieu sous forme de milieu de base de 500 ml, seul ou accompagné des suppléments, soit sous forme de composants individuels, soit sous forme de mélange de suppléments prémélangé. Les composants individuels permettent d'ajuster ou d'omettre certains facteurs, tandis que le mélange de suppléments s'ajoute en une seule étape. Le milieu de base est également disponible sans rouge de phénol dans les mêmes formats, ce qui évite toute interférence avec les mesures par fluorescence et colorimétriques, ainsi que la faible activité œstrogénique du rouge de phénol. Des suppléments sont nécessaires à l’utilisation, et les deux formats de suppléments sont également disponibles séparément. Une fois complété, le milieu complet contient 10 % de FCS (50 ml pour 500 ml de milieu de base).

€180.00

hors taxes et frais de port

Milieu de congélation CM-1 - 100 ml

Le milieu de congélation CM-1 de Cytion est un milieu de cryoconservation de pointe conçu pour garantir un niveau optimal de viabilité et de fonctionnalité cellulaires après décongélation. Ce milieu polyvalent convient à un large éventail de types cellulaires, tant humains qu’animaux, ce qui en fait un outil indispensable pour diverses applications de recherche. Formulé à partir d’une combinaison minutieusement équilibrée de cryoprotecteurs et de nutriments essentiels, le Freeze Medium CM-1 minimise la formation de cristaux de glace et le stress cellulaire pendant le processus de congélation, préservant ainsi l’intégrité cellulaire. Les principales caractéristiques du milieu de congélation CM-1 sont les suivantes : • Large compatibilité : efficace pour un large éventail de types cellulaires, y compris les cellules primaires, les cellules souches et les lignées cellulaires établies. • Viabilité élevée : optimisé pour maximiser la récupération et la viabilité des cellules après décongélation, garantissant ainsi des résultats expérimentaux fiables. • Prêt à l’emploi : préparé et stérilisé pour une utilisation immédiate, ce qui réduit le temps de préparation et le risque de contamination. • Stabilité améliorée : il conserve des performances constantes dans des conditions de cryoconservation standard, garantissant ainsi des résultats reproductibles. • Longue durée de conservation : le CM-1 est un milieu de cryoconservation prêt à l’emploi contenant du sérum qui peut être conservé au réfrigérateur pendant un an maximum. Utilisation du CM-1 pour la congélation des cellules Pour utiliser le CM-1 afin de congeler des cellules adhérentes et en suspension, procédez comme suit : • Pour les cellules adhérentes, lavez-les et dissociez-les du substrat de culture. Pour les cellules en suspension, passez directement à l’étape suivante. • Comptez les cellules pour vous assurer qu’elles sont à la concentration appropriée. • Centrifugez les cellules pour les précipiter, puis remettez-les en suspension dans le milieu de congélation CM-1. • Transférez les cellules remises en suspension dans des cryotubes. • Utilisez une méthode de congélation lente avant de transférer les cellules vers un stockage à long terme. Méthode Description Étapes ❄️ Congélation manuelle Une méthode étape par étape impliquant une baisse progressive de la température afin de garantir la viabilité des cellules. 1️⃣ Placer les cellules dans un milieu de congélation dans un congélateur à 4 °C pendant 40 minutes. 2️⃣ Transférer dans un congélateur à -80 °C pendant 24 heures. 3️⃣ Conserver les cellules dans de l'azote liquide pour une conservation à long terme. ❄️ Utilisation de Mr. Frosty Un appareil pratique permettant de contrôler la vitesse de congélation sans alimentation électrique. 1️⃣ Préparez les cellules dans des cryotubes contenant un milieu de congélation. 2️⃣ Placez les cryotubes dans le récipient Mr. Frosty. 3️⃣ Conservez-les à -80 °C pendant 24 heures avant de les transférer dans de l’azote liquide. ❄️ Congélateur à vitesse de congélation contrôlée Un congélateur de haute précision de Thermo Fisher ou d’autres fabricants, conçu pour une baisse contrôlée de la température. 1️⃣ Programmez l'appareil pour qu'il abaisse progressivement la température. 2️⃣ Placez les cellules préparées dans le congélateur. 3️⃣ Une fois le cycle de congélation terminé, transférez les cellules dans de l'azote liquide. • Conservez les cryotubes à des températures inférieures à -130 °C ou dans de l’azote liquide pour une conservation à long terme. Ingrédients • Contient du sérum fœtal bovin (FBS), du DMSO, du glucose et des sels • Capacité tampon : pH = 7,2 à 7,6 Le milieu de congélation CM-1 de Cytion offre une solution fiable pour la cryoconservation, garantissant une viabilité et une fonctionnalité cellulaires élevées après décongélation pour un large éventail d’applications de recherche.

€99.00

hors taxes et frais de port

Milieu de congélation CM-1 - 50 ml

Le milieu de congélation CM-1 de Cytion est un milieu de cryoconservation de pointe conçu pour garantir un niveau optimal de viabilité et de fonctionnalité cellulaires après décongélation. Ce milieu polyvalent convient à un large éventail de types cellulaires, tant humains qu’animaux, ce qui en fait un outil indispensable pour diverses applications de recherche. Formulé à partir d’une combinaison minutieusement équilibrée de cryoprotecteurs et de nutriments essentiels, le Freeze Medium CM-1 minimise la formation de cristaux de glace et le stress cellulaire pendant le processus de congélation, préservant ainsi l’intégrité cellulaire. Les principales caractéristiques du milieu de congélation CM-1 sont les suivantes : • Large compatibilité : efficace pour un large éventail de types cellulaires, y compris les cellules primaires, les cellules souches et les lignées cellulaires établies. • Viabilité élevée : optimisé pour maximiser la récupération et la viabilité des cellules après décongélation, garantissant ainsi des résultats expérimentaux fiables. • Prêt à l’emploi : préparé et stérilisé pour une utilisation immédiate, ce qui réduit le temps de préparation et le risque de contamination. • Stabilité améliorée : il conserve des performances constantes dans des conditions de cryoconservation standard, garantissant ainsi des résultats reproductibles. • Longue durée de conservation : le CM-1 est un milieu de cryoconservation prêt à l’emploi contenant du sérum qui peut être conservé au réfrigérateur pendant un an maximum. Utilisation du CM-1 pour la congélation des cellules Pour utiliser le CM-1 afin de congeler des cellules adhérentes et en suspension, procédez comme suit : • Pour les cellules adhérentes, lavez-les et dissociez-les du substrat de culture. Pour les cellules en suspension, passez directement à l’étape suivante. • Comptez les cellules pour vous assurer qu’elles sont à la concentration appropriée. • Centrifugez les cellules pour les précipiter, puis remettez-les en suspension dans le milieu de congélation CM-1. • Transférez les cellules remises en suspension dans des cryotubes. • Utilisez une méthode de congélation lente avant de transférer les cellules vers un stockage à long terme. Méthode Description Étapes ❄️ Congélation manuelle Méthode étape par étape impliquant une baisse progressive de la température afin de garantir la viabilité des cellules. 1️⃣ Placer les cellules dans un milieu de congélation dans un congélateur à 4 °C pendant 40 minutes. 2️⃣ Transférer dans un congélateur à -80 °C pendant 24 heures. 3️⃣ Conserver les cellules dans de l'azote liquide pour une conservation à long terme. ❄️ Utilisation de Mr. Frosty Un appareil pratique permettant de contrôler la vitesse de congélation sans alimentation électrique. 1️⃣ Préparez les cellules dans des cryotubes contenant un milieu de congélation. 2️⃣ Placez les cryotubes dans le récipient Mr. Frosty. 3️⃣ Conservez-les à -80 °C pendant 24 heures avant de les transférer dans de l’azote liquide. ❄️ Congélateur à vitesse de congélation contrôlée Un congélateur de haute précision de Thermo Fisher ou d’autres fabricants, conçu pour une baisse contrôlée de la température. 1️⃣ Programmez l'appareil pour qu'il abaisse progressivement la température. 2️⃣ Placez les cellules préparées dans le congélateur. 3️⃣ Une fois le cycle de congélation terminé, transférez les cellules dans de l'azote liquide. • Conservez les cryotubes à des températures inférieures à -130 °C ou dans de l’azote liquide pour une conservation à long terme. Ingrédients • Contient du FBS, du DMSO, du glucose et des sels • Capacité tampon : pH = 7,2 à 7,6 Le milieu de congélation CM-1 de Cytion offre une solution fiable pour la cryoconservation, garantissant une viabilité et une fonctionnalité cellulaires élevées après décongélation pour un large éventail d’applications de recherche.

€59.00

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Milieu F12K de Ham, contenant : 2,0 mM de L-glutamine, 2,0 mM de pyruvate de sodium, 2,5 g/L de NaHCO₃

Voici le milieu Ham's F-12K (Kaighn's), une version spécialisée du milieu Ham's F-12 conçue pour répondre aux exigences spécifiques de la recherche biologique. Ce milieu de pointe offre des avantages distincts, améliorant la culture des hépatocytes humains primaires, ainsi que des cellules hépatiques de rat et de poulet, en particulier dans des conditions de sérum réduit. Le milieu Ham's F-12K (Kaighn's) est soigneusement formulé pour optimiser les conditions de culture cellulaire. Il se caractérise par une composition enrichie, fournissant des concentrations élevées de composants essentiels tels que les acides aminés et le pyruvate de sodium, ainsi que des éléments supplémentaires, notamment la putrescine, la thymidine, l’hypoxanthine et le zinc. Ces ajouts permettent aux chercheurs de compléter le milieu avec une quantité minimale de sérum ou des composants définis pour des types cellulaires spécifiques, facilitant ainsi la mise en place de conditions expérimentales précises. Il convient de noter que le milieu F-12K (Kaighn) de Ham ne contient ni protéines ni facteurs de croissance. Par conséquent, un ajout de facteurs de croissance et de sérum fœtal bovin (FBS) est souvent nécessaire, ce qui permet aux chercheurs d’adapter le milieu aux besoins de leurs lignées cellulaires spécifiques. Pour des performances optimales, la concentration en FBS doit être soigneusement ajustée pour chaque lignée cellulaire, afin de garantir une croissance et un fonctionnement optimaux. Pour maintenir un pH physiologique, le milieu F-12K (Kaighn) de Ham utilise un système tampon à base de bicarbonate de sodium (2,5 g/L), ce qui nécessite un environnement contrôlé à 5-10 % de CO₂ pendant la culture. Cela garantit que le pH du milieu reste dans la fourchette idéale pour la croissance et la viabilité cellulaires. Contrôle qualité • pH = 7,2 ± 0,02 à 20-25 °C. • Chaque lot a été testé pour vérifier sa stérilité et l'absence de mycoplasmes et de bactéries. Conservation • Conserver au réfrigérateur entre +2 °C et +8 °C, à l’abri de la lumière. La congélation ainsi que le réchauffement jusqu’à +37 °C altèrent la qualité du produit. • Ne pas chauffer le milieu à plus de 37 °C ni utiliser de sources de chaleur non contrôlables (par exemple, un four à micro-ondes). • Si seule une partie du milieu doit être utilisée, prélever cette quantité du flacon et la réchauffer à température ambiante. • La durée de conservation de tous les milieux, à l'exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication. Composition Composants mg/L Sels inorganiques Chlorure de calcium x 2H₂O 135,24 Sulfate de cuivre(II) x 5H₂O 0,00 Sulfate de fer (II) x 7H₂O 0,83 Chlorure de magnésium x 6H₂O 105,72 Sulfate de magnésium x 7H₂O 394,49 Chlorure de potassium 283,29 Dihydrogénophosphate de potassium 58,52 Chlorure de sodium 7597,20 Hydrogénophosphate disodique anhydre 115,02 Sulfate de zinc heptahydraté 0,14 Autres composants D(+)-glucose anhydre 1 260,00 Hypoxanthine 4,08 Acide DL-α-lipoïque 0,21 Rouge de phénol 3,00 Putrescine x 2HCl 0,32 Pyruvate de sodium 220,00 NaHCO₃ 2 500,00 Thymidine 0,73 Acides aminés L-alanine 17,82 L-arginine x HCl 421,40 L-asparagine x H₂O 30,02 Acide L-aspartique 26,62 L-cystéine x HCl x H₂O 70,24 L-glutamine 292,20 Acide L-glutamique 29,42 Glycine 15,01 L-histidine x HCl x H₂O 41,92 L-isoleucine 7,87 L-Leucine 26,24 L-lysine x HCl 73,04 L-méthionine 8,95 L-phénylalanine 9,91 L-proline 69,06 L-sérine 21,02 L-thréonine 23,82 L-tryptophane 4,08 L-tyrosine 10,87 L-valine 23,42 Vitamines D(+)-biotine 0,07 D-pantothénate de calcium 0,48 Chlorure de choline 13,96 Acide folique 1,32 Myo-inositol 18,02 Nicotinamide 0,04 Pyridoxine x HCl 0,06 Riboflavine 0,04 Thiamine x HCl 0,34 Vitamine B12 1,36

€108.00

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Milieu F12 de Ham, contenant : 1,0 mM de glutamine stable, 1,0 mM de pyruvate de sodium, 1,176 g/L de NaHCO₃

Le milieu Ham's F-12, également connu sous le nom de « Ham's F-12 Nutrient Mix », est un milieu de base largement utilisé, spécialement conçu pour la culture cellulaire. Il est couramment employé pour la culture en monocouche sans sérum de cellules d'ovaires de hamster chinois (CHO), de cellules pulmonaires et de cellules L de souris. De plus, le Ham's F-12 est le milieu de choix pour le test de toxicité clonale (CTA). L'un de ses avantages notables est sa capacité à favoriser la croissance cellulaire sans qu'il soit nécessaire d'ajouter du sérum. Cela élimine toute interférence potentielle causée par les composants du sérum, garantissant ainsi des résultats expérimentaux cohérents et fiables. En offrant un environnement de culture sans sérum, le milieu Ham's F-12 permet aux chercheurs de mieux contrôler leurs recherches. Une autre caractéristique clé du milieu Ham's F-12 est son aptitude à la mise en culture de cellules isolées. Cela en fait un excellent choix pour une grande variété de lignées cellulaires, notamment les cellules CHO, les cellules pulmonaires et les cellules L de souris. La composition nutritionnelle optimisée de ce milieu facilite l’adhérence et la croissance efficaces des cellules individuelles, permettant ainsi la mise en place de cultures cellulaires homogènes avec une meilleure reproductibilité. De plus, le milieu F-12 de Ham s’est imposé comme le milieu de prédilection pour le test de toxicité clonale (CTA). Ce test joue un rôle essentiel dans l’évaluation des effets cytotoxiques de certaines substances sur les cellules. En utilisant le milieu F-12 de Ham dans le cadre du CTA, les chercheurs peuvent évaluer avec précision l’impact de divers composés ou traitements sur des cellules individuelles, ce qui fournit des informations précieuses sur les profils toxicologiques. Contrôle qualité • pH = 7,2 ± 0,02 à 20-25 °C. • Chaque lot a été testé pour vérifier sa stérilité et l’absence de mycoplasmes et de bactéries. Conservation • Conserver au réfrigérateur entre +2 °C et +8 °C, à l’abri de la lumière. La congélation et le réchauffement jusqu’à +37 °C altèrent la qualité du produit. • Ne pas chauffer le milieu à plus de 37 °C ni utiliser de sources de chaleur non contrôlables (par exemple, un four à micro-ondes). • Si seule une partie du milieu doit être utilisée, prélevez cette quantité du flacon et réchauffez-la à température ambiante. • La durée de conservation de tous les milieux, à l’exception du milieu de base, est de 8 semaines à compter de la date de fabrication. Composition Composants mg/L Sels inorganiques Chlorure de calcium x 2H₂O 44,00 Sulfate de cuivre(II) x 5H₂O 0,00 Sulfate de fer (II) x 7H₂O 0,83 Chlorure de magnésium x 6H₂O 122,00 Chlorure de potassium 223,65 Chlorure de sodium 7 599,00 Hydrogénophosphate disodique anhydre 142,04 Sulfate de zinc heptahydraté 0,86 Autres composants D(+)-glucose anhydre 1 801,60 Hypoxanthine 4,08 Acide linoléique 0,08 Acide DL-α-lipoïque 0,21 Rouge de phénol 1,20 Putrescine × 2HCl 0,16 Pyruvate de sodium 110,00 Thymidine 0,73 NaHCO₃ 1 176,00 Acides aminés L-alanine 8,91 L-arginine x HCl 210,70 L-asparagine x H₂O 15,01 Acide L-aspartique 13,31 L-cystéine × HCl × H₂O 35,12 L-alanyl-L-glutamine 217,30 Acide L-glutamique 14,71 Glycine 7,51 L-histidine × HCl × H₂O 20,96 L-isoleucine 3,94 L-Leucine 13,12 L-lysine x HCl 36,54 L-méthionine 4,48 L-phénylalanine 4,96 L-proline 34,53 L-sérine 10,51 L-thréonine 11,91 L-tryptophane 2,04 L-tyrosine 5,44 L-valine 11,71 Vitamines D(+)-biotine 0,01 D-pantothénate de calcium 0,24 Chlorure de choline 13,96 Acide folique 1,32 myo-inositol 18,02 Nicotinamide 0,04 Pyridoxine x HCl 0,06 Riboflavine 0,04 Thiamine x HCl 0,34 Vitamine B12 1,36

€25.00

hors taxes et frais de port

HEPES Buffer Solution (1M)

Volume: 100 ml Storage: +2°C to +8°C Sterility: Sterile-filtered HEPES Buffer Solution (1 M), also known as N-2-hydroxyethylpiperazine-N-2-ethanesulfonic acid, is a zwitterionic organic buffering agent widely used in cell culture media. It is designed to maintain stable pH conditions in the physiological range of 6.7 to 8.6, supporting optimal cellular function during in vitro applications. Application and Benefits HEPES provides reliable buffering capacity in cell culture systems, particularly when cells are handled outside a CO₂ incubator. The addition of 10–25 mM HEPES to culture media offers enhanced pH stability during extended manipulation periods, helping to maintain consistent experimental conditions. This buffer is membrane-impermeable, has minimal interference with biochemical reactions, and demonstrates strong chemical and enzymatic stability. These properties make it suitable for a wide range of cell culture and biochemical applications. Formulation and Usage The solution is supplied as a 1 M concentrate prepared in cell culture–grade water and is sterile-filtered for use in contamination-sensitive environments. It can be diluted to the desired working concentration depending on application requirements. Store at +2°C to +8°C and handle under aseptic conditions to preserve product integrity. For research use only. Not for use in diagnostic or therapeutic procedures. Not for use in humans or animals.

€52.00

hors taxes et frais de port

IMDM, w: 4.5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 25 mM HEPES, w: 1.0 mM Sodium pyruvate, w: 3.024 g/L NaHCO3

Iscove's Modified Dulbecco's Medium (IMDM) is a complex and enriched growth medium for cell culture. IMDM is a modification of DMEM containing selenium and has additional amino acids, vitamins, and inorganic salts compared to DMEM. It lacks iron and requires supplementation with Fetal Bovine Serum (FBS). IMDM uses a sodium bicarbonate buffer system and requires a 5-10% CO2 environment to maintain physiological pH. IMDM is well suited for rapidly proliferating, high-density cell cultures, including Jurkat, COS-7, and macrophage cells. The various modifications of IMDM available for a range of cell culture applications can be found using the media selector tool. Liquid media provide essential nutrients for all cell culture applications. Each of our high-quality cell culture media is manufactured according to the initially published formula or modifications necessary to the consistent performance and stability of the culture medium. IMDM vs. DMEM IMDM contains potassium nitrate instead of ferric nitrate and HEPES and sodium pyruvate. The additional components in IMDM make it more suitable for specialized cell types and specific applications than DMEM. IMDM vs. RPMI IMDM and RPMI have different formulations that may be relevant for PMA/ionomycin stimulation. One significant difference is the concentration of Ca2+. While RPMI contains 0.42 mM Ca2+, IMDM contains 1.49 mM. Quality control • pH = 7.2 +/- 0.02 at 20-25°C. • Each lot has been tested for sterility and absence of mycoplasma and bacteria. Maintenance • Keep refrigerated at +2°C to +8°C in the dark. Freezing and warming up to +37° C minimize the quality of the product. • Do not heat the medium to more than 37° C or use uncontrollable sources of heat (e.g., microwave appliances). • If only a part of the medium is to be used, remove this amount from the bottle and warm it up at room temperature. • Shelf life for any medium except for the basic medium is 8 weeks from the date of manufacture. Composition Components mg/L Inorganic Salts Calcium chloride x 2 H2O 219,00 Potassium chloride 330,00 Potassium nitrate 0.076 Magnesium sulfate anhydrous 97,73 Sodium chloride 4,505.00 Sodium dihydrogen phosphate anhydrous 109,00 Sodium selenite 0,02 Other Components D(+)-Glucose anhydrous 4,500.00 HEPES 5,958.00 Sodium pyruvate 110,00 Phenol red 15,00 Amino Acids L-Alanine 25,00 L-Arginine x HCl 84,00 L-Asparagine x H2O 25,00 L-Aspartic acid 30,00 L-Cystine x 2HCl 91,24 L-Glutamine 584,00 L-Glutamic acid 75,00 Glycine 30,00 L-Histidine x HCl x H2O 42,00 L-Isoleucine 104,80 L-Leucine 104,80 L-Lysine x HCl 146,20 L-Methionine 30,00 L-Phenylalanine 66,00 L-Proline 40,00 L-Serine 42,00 L-Threonine 95,20 L-Tryptophan 16,00 L-Tyrosine x 2Na 104,20 L-Valine 93,60 Vitamins D(+)-Biotin 0.013 D-Calcium pantothenate 4,00 Choline chloride 4,00 Folic acid 4,00 myo-Inositol 7,20

€25.00

hors taxes et frais de port

Milieux de culture cellulaire : aperçu général

Dans le domaine des sciences de la vie, la culture cellulaire constitue l’une des méthodologies les plus importantes. Le terme « culture cellulaire » désigne le prélèvement de cellules, de tissus ou d’organes sur un animal ou une plante, puis leur implantation dans un environnement artificiel propice à leur survie et/ou à leur croissance. Les conditions environnementales fondamentales pour un développement cellulaire optimal sont une température contrôlée, un substrat permettant l’adhérence des cellules, un milieu de culture adéquat et un incubateur maintenant un pH et une osmolalité optimaux. Les cellules doivent bénéficier de ces conditions pour se développer pleinement.

Le choix d’un milieu de croissance adapté à la culture in vitro constitue l’étape à la fois la plus critique et la plus essentielle de la culture cellulaire. Un milieu de croissance, également appelé milieu de culture, est un liquide ou un gel formulé pour favoriser le développement d’organismes à l’échelle microscopique, cellulaire ou végétale. Le milieu utilisé pour la culture cellulaire contient souvent un apport suffisant en énergie et en substances régulant le cycle cellulaire. Les principaux composants d’un milieu de culture sont les acides aminés, les vitamines, les sels inorganiques, le glucose et le sérum. Le sérum est ajouté au milieu car il sert de source de facteurs de croissance, d’hormones et de facteurs d’adhésion. Outre l’apport de nutriments, le milieu contribue également au maintien des niveaux de pH et d’osmolalité.

Types de milieux utilisés en culture cellulaire

Les cellules humaines et animales peuvent être cultivées soit dans un milieu artificiel ou synthétique, soit dans un milieu entièrement naturel enrichi d’éléments naturels. Nous vous présentons ci-après un aperçu des différents types de milieux actuellement disponibles.

Milieux naturels

Les milieux naturels ne contiennent que des fluides biologiques présents à l’état naturel. Ils sont très utiles et faciles à utiliser pour la culture d’une grande variété de types de cellules animales. Le manque de connaissances sur la composition exacte des milieux naturels est le principal facteur contribuant à la faible reproductibilité des résultats obtenus avec ces derniers.

Milieux artificiels

La préparation de milieux artificiels ou synthétiques implique l’ajout de nutriments (organiques et inorganiques), de protéines sériques, de glucides, de cofacteurs, de vitamines et de sels, ainsi que de phases gazeuses d’O₂ et de CO₂ [1].

Divers types de milieux artificiels ont été mis au point afin de remplir une ou plusieurs des fonctions suivantes : 1) Survie immédiate (une solution saline équilibrée présentant un pH et une pression osmotique précis). 2) Survie prolongée (une solution saline équilibrée enrichie de différentes formulations de composés organiques et/ou de sérum). 3) Développement indéfini. 4) Fonctions spécialisées.

Il existe quatre classifications distinctes pour les milieux artificiels :

Milieux contenant du sérum

Le type de complément le plus fréquemment utilisé dans les milieux destinés à la culture de cellules animales est le sérum fœtal bovin. Il est ajouté au milieu de culture en tant que complément peu coûteux afin d’obtenir les meilleures conditions de croissance possibles. Outre son rôle de transporteur ou de chélateur pour les nutriments instables ou insolubles dans l’eau, les hormones et les facteurs de croissance, les inhibiteurs de protéases et d’autres substances, le sérum se lie également aux molécules nocives et les neutralise.

Milieux sans sérum

La présence de sérum dans les milieux de culture présente un certain nombre d’inconvénients et peut entraîner des erreurs d’interprétation majeures dans la recherche immunologique [2, 3]. Divers milieux sans sérum ont été mis au point [4, 5]. Ces milieux sont généralement formulés spécifiquement pour permettre la culture d’un seul type de cellule, comme le Knockout Serum Replacement et le Knockout DMEM de Thermo Fisher Scientific, ainsi que le milieu mTESR de Stem Cell Technologies [6], destinés aux cellules souches [7].

De plus, ces milieux intègrent des quantités définies de facteurs de croissance purifiés, de lipoprotéines et d’autres protéines, qui sont habituellement fournies par le sérum [8]. Ces milieux sont souvent qualifiés de « milieux de culture définis », car les composants qui les constituent sont bien connus.

Milieux chimiquement définis

Ces milieux contiennent des composants inorganiques et organiques ultra-purs qui n’ont subi aucune forme de contamination. Ils peuvent également comporter des ajouts de protéines pures, telles que des facteurs de croissance.

La modification génétique de bactéries ou de levures, associée à l’ajout d’acides gras spécifiques, de vitamines, de cholestérol et d’acides aminés, permet d’obtenir leurs composants [9].

Milieux sans protéines

Les milieux sans protéines sont ceux qui ne contiennent absolument aucune protéine et ne comprennent que des éléments non protéiques. Par rapport aux milieux enrichis en sérum, l’utilisation de milieux sans protéines favorise une plus grande prolifération cellulaire et une meilleure expression protéique, et facilite la purification de tout produit généré lors d’un processus en aval [10-12]. Les formulations telles que le MEM et le RPMI-1640 ne contiennent pas de protéines. Toutefois, un supplément protéique peut être ajouté si nécessaire.

Les milieux de culture et leurs composants de base

Les milieux de culture commerciaux sont disponibles sous forme de poudre ou de liquide et contiennent souvent divers nutriments tels que des acides aminés, du glucose, des sels, des vitamines et d’autres compléments alimentaires.

Les besoins en ces composants varient selon chaque lignée cellulaire, et ces variations expliquent la grande diversité des formulations de milieux de culture. Chaque composant remplit une fonction spécifique, qui sera décrite dans les paragraphes suivants :

Systèmes tampons

Pour maintenir des conditions de croissance optimales, le pH doit être contrôlé, ce qui est souvent réalisé à l’aide de l’un des deux systèmes tampons suivants :

Système tampon naturel

Le rapport CO₂/H₂CO₃ dans l’atmosphère est identique à celui du milieu, ce qui crée un mécanisme tampon naturel. Afin de préserver ce mécanisme tampon naturel, les cultures doivent être maintenues dans un environnement contenant 5 à 10 % de CO₂, ce qui est souvent obtenu à l’aide d’un incubateur à CO₂. L’un des principaux avantages de l’utilisation d’un tampon naturel réside dans son faible coût et sa sécurité.

HEPES

La tamponnage chimique utilisant le zwitterion HEPES présente une plus grande capacité tampon dans la plage de pH comprise entre 7,2 et 7,4 et ne nécessite pas d’environnement gazeux régulé. Pour certains types de cellules, une dose trop importante d’HEPES peut s’avérer nocive. Les milieux contenant de l’HEPES sont par ailleurs beaucoup plus sensibles aux effets phototoxiques de la lumière fluorescente [13].

Rouge de phénol

L’indicateur de pH « rouge de phénol » est souvent inclus dans les milieux de culture disponibles dans le commerce, ce qui permet une surveillance continue du pH. À mesure que les cellules se multiplient, les métabolites qu’elles produisent entraînent une variation du pH et, par conséquent, un changement de couleur du milieu. Le rouge de phénol a un double effet sur la couleur du milieu : il le fait virer au jaune à un pH acide et au violet à un pH alcalin. Un pH de 7,4, valeur optimale pour la culture cellulaire, donne au milieu une couleur rouge fluorescente.

Mais le rouge de phénol présente quelques inconvénients : tout d’abord, il est capable de mimer l’action d’un certain nombre d’hormones stéroïdiennes, principalement les œstrogènes [14]. Par conséquent, lors de l’étude de cellules sensibles aux œstrogènes, comme les tissus mammaires, il est recommandé d’utiliser un milieu exempt de rouge de phénol. L’équilibre sodium-potassium est perturbé par la présence de rouge de phénol dans plusieurs formulations sans sérum. L’ajout de sérum ou d’hormone hypophysaire bovine au milieu peut contrebalancer cet effet [15]. Troisièmement, la détection lors d’expériences de cytométrie en flux est entravée par la présence de rouge de phénol.

Sels inorganiques

Les milieux contenant des sels inorganiques, tels que les ions sodium, potassium et calcium, contribuent à maintenir l’équilibre osmotique et à réguler le potentiel membranaire.

Acides aminés

Les acides aminés étant les composants fondamentaux des protéines, ils constituent un élément essentiel de tous les milieux de culture cellulaire jamais conçus. Les cellules étant incapables de produire certaines acides aminés par elles-mêmes, il est important que le milieu de culture contienne des acides aminés essentiels. Ils sont indispensables à la prolifération cellulaire, et leur concentration détermine la densité cellulaire maximale pouvant être atteinte. La L-glutamine, un acide aminé essentiel, revêt notamment une importance particulière.

La L-glutamine sert de source d’énergie secondaire pour le métabolisme et apporte de l’azote nécessaire à la production de NAD, de NADPH et de nucléotides. La L-glutamine étant un acide aminé instable qui, avec le temps, se transforme en une forme que les cellules ne peuvent pas utiliser, elle doit être ajoutée au milieu de culture.

De plus, des acides aminés non essentiels peuvent être ajoutés au milieu de culture afin de reconstituer les réserves de ceux qui ont été consommés au cours du processus de croissance. La croissance des cellules est stimulée et leur viabilité est améliorée lorsque le milieu de culture est enrichi en acides aminés non essentiels.

Glucides

Les glucides, sous forme de sucres, constituent la principale source d’énergie. De nombreux milieux contiennent également du maltose et du fructose, en plus des sucres plus courants que sont le glucose et le galactose.

Protéines et peptides

L’albumine, la transferrine et la fibronectine sont les protéines et peptides les plus couramment utilisés. Ils revêtent une importance particulière dans les milieux ne contenant pas de sérum. L’albumine, la transferrine, l’aprotinine, la fétuine et la fibronectine font partie des protéines que l’on peut trouver dans le sérum, qui constitue une source riche en protéines.

L’albumine est la principale protéine présente dans le sang ; sa fonction consiste à se lier à diverses substances – notamment l’eau, les sels, les acides gras libres, les hormones et les vitamines – et à les transporter entre les différents organes et cellules. La capacité de l’albumine à se lier à des substances chimiques en fait un candidat efficace pour éliminer les composés nocifs du milieu dans lequel les cellules sont cultivées.

L’aprotinine est un agent protecteur dans les systèmes de culture cellulaire, car elle est stable à pH neutre et acide, et résiste aux températures élevées ainsi qu’à la dégradation pouvant être causée par les enzymes protéolytiques. Elle est capable d’inhiber un certain nombre de protéases à sérine, dont la trypsine, entre autres.

La fétuine est une glycoprotéine que l’on peut détecter en quantités plus importantes dans le sérum des fœtus et des nouveau-nés que dans celui des adultes. De plus, elle agit comme un inhibiteur des protéases à sérine. La fibronectine est une protéine qui joue un rôle essentiel dans le processus d’adhésion cellulaire. La transferrine est une protéine qui transporte le fer et qui est chargée de l'acheminer vers les membranes cellulaires.

Acides gras et lipides

Ils jouent un rôle crucial dans les milieux sans sérum, en l'absence de sérum.

Vitamines

De nombreuses vitamines sont nécessaires au développement et à la prolifération cellulaires. Les cellules ne peuvent pas produire de vitamines en quantités suffisantes ; celles-ci sont donc indispensables en culture tissulaire sous forme de compléments alimentaires.

En culture cellulaire, le sérum est la principale source de vitamines ; cependant, les milieux sont également enrichis en diverses vitamines afin de les adapter à un type cellulaire spécifique. Le plus souvent, les vitamines du groupe B sont utilisées pour stimuler la croissance.

Oligo-éléments

Les éléments chimiques tels que le cuivre, le zinc, le sélénium et les intermédiaires de la voie des acides tricarboxyliques sont appelés oligo-éléments. Les oligo-éléments sont souvent ajoutés aux milieux ne contenant pas de sérum afin de remplacer ceux qui sont généralement présents dans le sérum. Ces éléments sont des composants chimiques importants, indispensables au bon développement cellulaire. De nombreuses réactions biochimiques dépendent de certains micronutriments, comme l’activité enzymatique.

Compléments de milieu

Le milieu de croissance complet recommandé pour certaines lignées cellulaires nécessite des composants supplémentaires qui sont absents des milieux de base et du sérum. Ces compléments alimentaires favorisent la croissance cellulaire et un bon fonctionnement métabolique.

Bien que les hormones, les facteurs de croissance et les molécules de signalisation soient essentiels à la prolifération adéquate de certaines lignées cellulaires, les précautions suivantes doivent toujours être prises : l’ajout de compléments pouvant modifier l’osmolalité du milieu de culture complet, ce qui peut inhiber le développement cellulaire, il est toujours conseillé de vérifier l’osmolalité après l’ajout des compléments. Pour la plupart des lignées cellulaires, l’osmolalité optimale se situe entre 260 et 320 mOSM/kg.

Antibiotiques

Les antibiotiques sont souvent utilisés pour inhiber le développement de contaminants bactériens et fongiques [16], bien qu’ils ne soient pas indispensables à la croissance cellulaire. Étant donné que les antibiotiques peuvent masquer une contamination par des mycoplasmes et des bactéries résistantes, leur utilisation systématique n’est pas recommandée pour la culture cellulaire [17, 18].

De plus, les antibiotiques peuvent perturber le métabolisme des cellules hypersensibles. Les associations pénicilline-streptomycine fabriquées par MilliporeSigma et Life Technologies sont couramment utilisées. La plasmocine a été utilisée dans la culture des lignées cellulaires de gliome TS603, TS516 et BT260 [19], et s’est révélée efficace pour éliminer la contamination par les mycoplasmes (20).

Sérum

Le sérum contient des albumines, des facteurs de croissance et des inhibiteurs de croissance. Le sérum est l’un des composants les plus importants du milieu de culture cellulaire, car il apporte des acides aminés, des protéines, des vitamines (en particulier les vitamines liposolubles telles que A, D, E et K), des glucides, des lipides, des hormones, des facteurs de croissance, des minéraux et des oligo-éléments.

Le sérum d’origine fœtale et de veau est souvent utilisé pour favoriser le développement des cellules en culture. Le sérum fœtal est une source abondante de facteurs de croissance et convient au clonage cellulaire ainsi qu’au développement de cellules sensibles. En raison de ses capacités réduites à favoriser la croissance, le sérum de veau est utilisé dans les expériences d’inhibition par contact. Les milieux de culture normaux contiennent souvent entre 2 % et 10 % de sérum. L’ajout de sérum au milieu de culture répond aux objectifs suivants [21] :

Le sérum apporte les nutriments essentiels aux cellules (à la fois en solution et liés à des protéines).
Le sérum contient plusieurs facteurs de croissance et hormones impliqués dans la stimulation de la croissance et l’activité cellulaire spécialisée.
Il fournit de nombreuses protéines de liaison, telles que l’albumine et la transferrine, qui transportent d’autres substances chimiques à l’intérieur de la cellule. Par exemple, l’albumine achemine les lipides, les vitamines, les hormones, etc. vers les cellules.
Il fournit également des protéines, telles que la fibronectine, qui renforcent l’adhésion des cellules au substrat. De plus, il produit des éléments favorisant l’étalement qui contribuent à l’expansion cellulaire avant la division.
Il fournit des inhibiteurs de protéases qui empêchent la protéolyse dans les cellules.
Il contient également des minéraux tels que Na+, K+, Zn2+ et Fe2+.
Il augmente la viscosité du milieu, protégeant ainsi les cellules des lésions mécaniques lors de l’agitation en culture en suspension.
Elle fait également office de tampon.

Références

[1] Morgan J, Morton H, Parker R. Nutrition des cellules animales en culture tissulaire ; études préliminaires sur un milieu synthétique. Proc Soc Exp Biol Med. 1950 ; 73 : 1-8

[2] Kerbel R, Blakeslee D. Adsorption rapide d’un composant du sérum fœtal de veau par des cellules mammifères en culture. Une source potentielle d’artefacts dans les études sur les antisérums dirigés contre des antigènes spécifiques aux cellules. Immunology. 1976 ; 31 : 881-91

[3] Sula K, Draber P, Nouza K. L’ajout de sérum au milieu utilisé pour la préparation de suspensions cellulaires comme source possible d’artefacts dans les réactions à médiation cellulaire étudiées au moyen du test du ganglion lymphatique poplité. J Immunogenet. 1980 ; 7 : 483-9

[4] Mariani E, Mariani A, Monaco M, Lalli E, Vitale M, Facchini A. Milieux commerciaux sans sérum : croissance des hybridomes et production d’anticorps monoclonaux. J Immunol Methods. 1991 ; 145 : 175-83

[5] Barnes D, Sato G. Méthodes de culture cellulaire en milieu sans sérum. Anal Biochem. 1980 ; 102 : 255-70

[6] Yu H, Lu S, Gasior K, Singh D, Vazquez Sanchez S, Tapia O, et al. Les chaperons HSP70 acheminent la protéine TDP-43, exempte d’ARN, vers des coques sphériques liquides intranucléaires anisotropes. Science. 2021 ; 371 :

[7] Meharena H, Marco A, Dileep V, Lockshin E, Akatsu G, Mullahoo J, et al. La sénescence induite par le syndrome de Down perturbe l’architecture nucléaire des progéniteurs neuronaux. Cell Stem Cell. 2022 ; 29 : 116-130.e7

[8] Iscove N, Melchers F. Remplacement complet du sérum par de l’albumine, de la transferrine et des lipides de soja dans des cultures de lymphocytes B réactifs aux lipopolysaccharides. J Exp Med. 1978 ; 147 : 923-33

[9] Stoll T, Muhlethaler K, von Stockar U, Marison I. Amélioration systématique d’un milieu chimiquement défini et exempt de protéines pour la croissance d’hybridomes et la production d’anticorps monoclonaux. J Biotechnol. 1996 ; 45 : 111-23

[10] Darfler F. Un milieu sans protéines pour la croissance des hybridomes et d’autres cellules du système immunitaire. In Vitro Cell Dev Biol. 1990 ; 26 : 769-78

[11] Barnes D, Sato G. Culture cellulaire sans sérum : une approche unificatrice. Cell. 1980 ; 22 : 649-55

[12] Hamilton W, Ham R. Croissance clonale de lignées cellulaires de hamster chinois dans des milieux sans protéines. In Vitro. 1977 ; 13 : 537-47

[13] Zigler J, Lepe Zuniga J, Vistica B, Gery I. Analyse des effets cytotoxiques d’un milieu de culture contenant de l’HEPES exposé à la lumière. In Vitro Cell Dev Biol. 1985 ; 21 : 282-7

[14] Berthois Y, Katzenellenbogen J, Katzenellenbogen B. Le rouge de phénol présent dans les milieux de culture tissulaire est un œstrogène faible : implications pour l’étude des cellules sensibles aux œstrogènes en culture. Proc Natl Acad Sci U S A. 1986 ; 83 : 2496-500

[15] Karmiol S. Développement de milieux sans sérum. Dans : Master JRW, éd. Culture de cellules animales, 3e éd. Oxford : Oxford University Press ; 2000.

[16] Perlman D. Utilisation d’antibiotiques dans les milieux de culture cellulaire. Methods Enzymol. 1979 ; 58 : 110-6

[17] McGarrity G. Propagation et contrôle de l’infection mycoplasmique des cultures cellulaires. In Vitro. 1976 ; 12 : 643-8

[18] Masters J, Stacey G. Remplacement du milieu et repiquage des lignées cellulaires. Nat Protoc. 2007 ; 2 : 2276-84

[19] Chakraborty A, Laukka T, Myllykoski M, Ringel A, Booker M, Tolstorukov M, et al. L’histone déméthylase KDM6A détecte directement l’oxygène pour réguler la chromatine et le destin cellulaire. Science. 2019 ; 363 : 1217-1222

[20] Molla Kazemiha V, Azari S, Amanzadeh A, Bonakdar S, Shojaei Moghadam M, Habibi Anbouhi M, et al. Efficacité du Plasmocin™ sur diverses lignées cellulaires de mammifères infectées par des mollicutes, comparée à celle des antibiotiques couramment utilisés en culture cellulaire : une expérience locale. Cytotechnology. 2011 ; 63 : 609-20

[21] Kragh Hansen U. Aspects moléculaires de la liaison des ligands à l’albumine sérique. Pharmacol Rev. 1981 ; 33 : 17-53