GC-1 spg

La lignée cellulaire GC-1 spg a été immortalisée par transfection avec le plasmide pSV3-neo, qui héberge les séquences codantes pour l'antigène SV40 large T et la résistance à la néomycine. Cette modification génétique apporte non seulement une résistance à certains antibiotiques, mais favorise également la croissance continue des cellules en modifiant la régulation de leur cycle cellulaire, contournant ainsi la limite de Hayflick typique des cellules primaires. Ce processus d'immortalisation permet aux cellules de maintenir leur capacité de prolifération tout en conservant les principales caractéristiques phénotypiques des spermatogonies.

Phénotypiquement, la lignée cellulaire GC-1 spg présente des caractéristiques qui indiquent un stade de transition entre les spermatogonies de type B et les spermatocytes primaires, ce qui en fait un modèle particulièrement pertinent pour l'étude des premiers stades de la spermatogenèse. Les cellules expriment deux isoprotéines spécifiques du testicule : le cytochrome c et la lactate déshydrogénase C4. Ces marqueurs sont cruciaux pour l'étude du métabolisme cellulaire et de la gestion de l'énergie au cours de la spermatogenèse, car ils reflètent les voies métaboliques uniques actives dans les cellules germinales. L'expression de ces isoprotéines spécifiques souligne l'utilité de la lignée cellulaire dans l'exploration des aspects biochimiques et physiologiques de la fonction et du développement des cellules testiculaires.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie