Langsung ke isi
GC-1 spg
Tisu
Testis
Sinonim
GC-1spg, GC-1, GC1-SPG

GC-1 spg

Cell line · Nomor produk 300375

Lini sel GC-1 spg diimortalkan melalui transfeksi dengan plasmid pSV3-neo, yang mengandung urutan pengkodean untuk antigen T besar SV40 dan...

€550.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel GC-1 spg diabadikan melalui transfeksi dengan plasmid pSV3-neo, yang menyimpan sekuens pengkodean untuk antigen T besar SV40 dan resistensi neomisin. Modifikasi genetik ini tidak hanya memberikan resistensi terhadap antibiotik tertentu tetapi juga mendorong pertumbuhan sel yang berkelanjutan dengan mengubah regulasi siklus selnya, sehingga melewati batas Hayflick yang khas pada sel primer. Proses pengabadian ini memungkinkan sel untuk mempertahankan kapasitas proliferasi sambil mempertahankan karakteristik fenotipik utama spermatogonia.

Secara fenotipik, garis sel GC-1 spg menunjukkan karakteristik yang mengindikasikan tahap transisi antara spermatogonia tipe B dan spermatosit primer, menjadikannya model yang sangat relevan untuk mempelajari tahap awal spermatogenesis. Sel-sel mengekspresikan dua isoprotein spesifik testis: sitokrom c dan laktat dehidrogenase C4. Penanda-penanda ini sangat penting untuk mempelajari metabolisme sel dan manajemen energi selama spermatogenesis, yang mencerminkan jalur metabolisme unik yang aktif dalam sel germinal. Ekspresi isoprotein spesifik ini menggarisbawahi kegunaan garis sel dalam mengeksplorasi aspek biokimia dan fisiologis fungsi dan perkembangan sel testis.

Tisu
Testis
Aplikasi
kultur sel 3D
Sinonim
  • GC-1spg
  • GC-1
  • GC1-SPG

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This murine testis cell line (GC-1 spg) contains an SV40 T-Antigen expression plasmid (pSV3neo) including a Tn5-neo resistance marker, supporting immortalization. The construct is stably integrated into mouse spermatogonial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Epitel
Jenis sel
Spermatosit

04Pengidentifikasi

Referensi
GC-1 spg (nomor katalog Cytion 300375)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_8872

05Ekspresi dan kerentanan

Virus
Transforman: Antigen T virus Simian 40 (SV40)

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Jenis / subspesies
BALB/c
Usia donor
10 hari