Премини към съдържанието
GC-1 spg
Тъкан
Тестис
Синоними
GC-1spg, GC-1, GC1-SPG

Документи

GC-1 spg

Cell line · Номер на продукта 300375

Клетъчната линия GC-1 spg беше иммортализирана чрез трансфекция с плазмида pSV3-neo, който съдържа кодиращите последователности за големия Т-антиген на SV40 и...

€550.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия GC-1 spg е имортализирана чрез трансфекция с плазмида pSV3-neo, който съдържа кодиращите последователности за големия Т антиген SV40 и устойчивостта към неомицин. Тази генетична модификация не само осигурява резистентност към определени антибиотици, но и насърчава непрекъснатия растеж на клетките, като променя регулацията на клетъчния им цикъл, заобикаляйки по този начин границата на Хейфлик, характерна за първичните клетки. Този процес на имортализация позволява на клетките да поддържат пролиферативен капацитет, като същевременно запазват ключови фенотипни характеристики на сперматозоидите.

Фенотипно клетъчната линия GC-1 spg проявява характеристики, които са показателни за преходен стадий между сперматогония тип В и първични сперматоцити, което я прави особено подходящ модел за изучаване на ранните етапи на сперматогенезата. Клетките експресират два специфични за тестисите изопротеина: цитохром с и лактат дехидрогеназа С4. Тези маркери са от решаващо значение за изучаването на клетъчния метаболизъм и управлението на енергията по време на сперматогенезата, като отразяват уникалните метаболитни пътища, активни в зародишните клетки. Експресията на тези специфични изопротеини подчертава полезността на клетъчната линия за изследване на биохимичните и физиологичните аспекти на функцията и развитието на тестикуларните клетки.

Тъкан
Тестис
Приложения
3D клетъчна култура
Синоними
  • GC-1spg
  • GC-1
  • GC1-SPG

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This murine testis cell line (GC-1 spg) contains an SV40 T-Antigen expression plasmid (pSV3neo) including a Tn5-neo resistance marker, supporting immortalization. The construct is stably integrated into mouse spermatogonial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален
Тип клетка
Сперматоцити

04Идентификатори

Източник
GC-1 spg (каталожен номер 300375 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_8872

05Проява и предразположеност

Вируси
Трансформатор: T антиген на вируса на Симиан 40 (SV40)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
BALB/c
Възраст на донора
10 дни