GC-1 spg

GC-1 spg-cellinjen immortaliserades genom transfektion med pSV3-neo-plasmiden, som innehåller de kodande sekvenserna för SV40 large T-antigen och neomycinresistens. Denna genetiska modifiering ger inte bara resistens mot vissa antibiotika utan främjar också cellernas kontinuerliga tillväxt genom att förändra deras cellcykelreglering och därmed kringgå den Hayflick-gräns som är typisk för primära celler. Denna odödlighetsprocess gör att cellerna kan bibehålla sin proliferativa kapacitet samtidigt som de behåller spermatogoniernas viktigaste fenotypiska egenskaper.

Fenotypiskt uppvisar cellinjen GC-1 spg egenskaper som tyder på ett övergångsstadium mellan typ B-spermatogonier och primära spermatocyter, vilket gör den till en särskilt relevant modell för att studera de tidiga stadierna av spermatogenesen. Cellerna uttrycker två testisspecifika isoproteiner: cytokrom c och laktatdehydrogenas C4. Dessa markörer är avgörande för att studera cellmetabolism och energihantering under spermatogenesen och återspeglar de unika metaboliska vägar som är aktiva i könsceller. Uttrycket av dessa specifika isoproteiner understryker cellinjens användbarhet för att utforska de biokemiska och fysiologiska aspekterna av testikelcellernas funktion och utveckling.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring