İçeriğe atla
GC-1 topçu bataryası
Doku
Testis
Eş anlamlılar
GC-1spg, GC-1, GC1-SPG

GC-1 topçu bataryası

Cell line · Ürün numarası 300375

GC-1 spg hücre hattı, SV40 büyük T antijeni için kodlayıcı dizileri barındıran pSV3-neo plazmidiyle transfeksiyon yoluyla ölümsüzleştirilmiştir ve...

€550.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

GC-1 spg hücre hattı, SV40 büyük T antijeni ve neomisin direnci için kodlama dizilerini barındıran pSV3-neo plazmidi ile transfeksiyon yoluyla ölümsüzleştirilmiştir. Bu genetik modifikasyon sadece belirli antibiyotiklere karşı direnç sağlamakla kalmaz, aynı zamanda hücre döngüsü düzenlemelerini değiştirerek hücrelerin sürekli büyümesini teşvik eder, böylece birincil hücrelere özgü Hayflick sınırını atlar. Bu ölümsüzleştirme süreci, hücrelerin spermatogonyanın temel fenotipik özelliklerini korurken proliferatif kapasitelerini sürdürmelerini sağlar.

Fenotipik olarak, GC-1 spg hücre hattı, B tipi spermatogonia ve primer spermatositler arasında bir geçiş aşamasının göstergesi olan özellikler sergiler ve bu da onu spermatogenezin erken aşamalarını incelemek için özellikle uygun bir model haline getirir. Hücreler testise özgü iki izoprotein ifade eder: sitokrom c ve laktat dehidrojenaz C4. Bu belirteçler, spermatogenez sırasında hücre metabolizmasını ve enerji yönetimini incelemek için çok önemlidir ve germ hücrelerinde aktif olan benzersiz metabolik yolları yansıtır. Bu spesifik izoproteinlerin ekspresyonu, hücre hattının testiküler hücre fonksiyonu ve gelişiminin biyokimyasal ve fizyolojik yönlerini araştırmadaki faydasının altını çizmektedir.

Doku
Testis
Uygulamalar
3D hücre kültürü
Eş anlamlılar
  • GC-1spg
  • GC-1
  • GC1-SPG

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This murine testis cell line (GC-1 spg) contains an SV40 T-Antigen expression plasmid (pSV3neo) including a Tn5-neo resistance marker, supporting immortalization. The construct is stably integrated into mouse spermatogonial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Hücre türü
Spermatosit

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
GC-1 spg (Cytion katalog numarası 300375)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_8872

05İfade ve duyarlılık

Virüsler
Transformant: Simian virüs 40 (SV40) T antijeni

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
BALB/c
Bağışçının yaşı
10 gün