GC-1 spg

Die GC-1 spg-Zelllinie wurde durch Transfektion mit dem pSV3-neo-Plasmid immortalisiert, das die kodierenden Sequenzen für das SV40 large T-Antigen und die Neomycinresistenz enthält. Diese genetische Veränderung sorgt nicht nur für eine Resistenz gegen bestimmte Antibiotika, sondern fördert auch das kontinuierliche Wachstum der Zellen, indem sie ihre Zellzyklusregulation verändert und so die für Primärzellen typische Hayflick-Grenze umgeht. Dieser Prozess der Immortalisierung ermöglicht es den Zellen, ihre Vermehrungsfähigkeit aufrechtzuerhalten und gleichzeitig die wichtigsten phänotypischen Merkmale von Spermatogonien beizubehalten.

Phänotypisch weist die GC-1 spg-Zelllinie Merkmale auf, die auf ein Übergangsstadium zwischen Spermatogonien vom Typ B und primären Spermatozyten hinweisen, was sie zu einem besonders relevanten Modell für die Untersuchung der frühen Stadien der Spermatogenese macht. Die Zellen exprimieren zwei hodenspezifische Isoproteine: Cytochrom c und Laktatdehydrogenase C4. Diese Marker sind für die Untersuchung des Zellstoffwechsels und des Energiemanagements während der Spermatogenese von entscheidender Bedeutung und spiegeln die einzigartigen Stoffwechselwege wider, die in Keimzellen aktiv sind. Die Expression dieser spezifischen Isoproteine unterstreicht den Nutzen der Zelllinie für die Erforschung der biochemischen und physiologischen Aspekte der Funktion und Entwicklung von Hodenzellen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung