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GC-1 自走砲
ティッシュ
精巣
同義語
GC-1spg, GC-1, GC1-SPG

GC-1 自走砲

Cell line · 製品番号 300375

GC-1 spg細胞株は、SV40大型T抗原のコード配列および...を保有するpSV3-neoプラスミドのトランスフェクションにより不死化された。

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01概要

説明

GC-1spg細胞株は、SV40ラージT抗原とネオマイシン耐性のコード配列を持つpSV3-neoプラスミドをトランスフェクションして不死化した。この遺伝子組み換えは、ある種の抗生物質に対する耐性を与えるだけでなく、細胞周期の調節を変化させることによって細胞の継続的な増殖を促進し、初代細胞に典型的なヘイフリック限界を回避する。この不死化プロセスにより、細胞は精原細胞の主要な表現型の特徴を保持したまま増殖能力を維持することができる。

表現型的には、GC-1 spg細胞株は、B型精原細胞と初代精母細胞との間の過渡期を示す特徴を示し、精子形成の初期段階を研究するモデルとして特に適している。この細胞は2つの精巣特異的アイソタンパク質、シトクロムcと乳酸脱水素酵素C4を発現している。これらのマーカーは、精子形成期の細胞代謝とエネルギー管理を研究する上で極めて重要であり、生殖細胞で活動するユニークな代謝経路を反映している。これらの特異的アイソタンパク質の発現は、精巣細胞の機能と発達の生化学的・生理学的側面の研究において、この細胞株が有用であることを強調している。

ティッシュ
精巣
用途
3D細胞培養
同義語
  • GC-1spg
  • GC-1
  • GC1-SPG

02分類

生物
マウス
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This murine testis cell line (GC-1 spg) contains an SV40 T-Antigen expression plasmid (pSV3neo) including a Tn5-neo resistance marker, supporting immortalization. The construct is stably integrated into mouse spermatogonial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮
細胞の種類
精母細胞

04識別子

引用
GC-1 spg(Cytion カタログ番号 300375)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_8872

05発現と感受性

ウイルス
形質転換体:シミアンウイルス40(SV40)T抗原

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
BALB/c
ドナーの年齢
10日