GC-1 spg

GC-1 spg-cellelinjen ble udødeliggjort gjennom transfeksjon med pSV3-neo plasmidet, som inneholder de kodende sekvensene for SV40 large T-antigenet og neomycinresistens. Denne genetiske modifikasjonen gir ikke bare resistens mot visse antibiotika, men fremmer også kontinuerlig vekst av cellene ved å endre cellesyklusreguleringen, slik at man omgår Hayflick-grensen som er typisk for primærceller. Denne udødeliggjøringsprosessen gjør at cellene kan opprettholde sin proliferative kapasitet samtidig som de beholder spermatogonienes fenotypiske egenskaper.

Fenotypisk sett har GC-1 spg-cellelinjen egenskaper som indikerer et overgangsstadium mellom type B-spermatogonier og primære spermatocytter, noe som gjør den til en spesielt relevant modell for å studere de tidlige stadiene av spermatogenesen. Cellene uttrykker to testisspesifikke isoproteiner: cytokrom c og laktatdehydrogenase C4. Disse markørene er avgjørende for å studere cellemetabolisme og energistyring under spermatogenesen, og gjenspeiler de unike metabolske veiene som er aktive i kjønnscellene. Uttrykket av disse spesifikke isoproteinene understreker cellelinjens anvendelighet i utforskningen av de biokjemiske og fysiologiske aspektene ved testikkelcellenes funksjon og utvikling.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring