GC-1 spg

La lignée cellulaire GC-1 spg a été immortalisée par transfection avec le plasmide pSV3-neo, qui contient les séquences codantes de l’antigène T majeur du SV40 et du gène de résistance à la néomycine. Cette modification génétique confère non seulement une résistance à certains antibiotiques, mais favorise également la croissance continue des cellules en modifiant la régulation de leur cycle cellulaire, contournant ainsi la limite de Hayflick typique des cellules primaires. Ce processus d’immortalisation permet aux cellules de conserver leur capacité proliférative tout en conservant les principales caractéristiques phénotypiques des spermatogonies.

Sur le plan phénotypique, la lignée cellulaire GC-1 spg présente des caractéristiques indiquant un stade de transition entre les spermatogonies de type B et les spermatocytes primaires, ce qui en fait un modèle particulièrement pertinent pour l’étude des premiers stades de la spermatogenèse. Les cellules expriment deux isoprotéines spécifiques des testicules : le cytochrome c et la lactate déshydrogénase C4. Ces marqueurs sont essentiels à l’étude du métabolisme cellulaire et de la gestion de l’énergie au cours de la spermatogenèse, reflétant les voies métaboliques uniques actives dans les cellules germinales. L’expression de ces isoprotéines spécifiques souligne l’utilité de cette lignée cellulaire pour l’étude des aspects biochimiques et physiologiques du fonctionnement et du développement des cellules testiculaires.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.