GC-1 spg

De GC-1 spg cellijn werd geïmmortaliseerd door transfectie met het pSV3-neo plasmide, dat de coderende sequenties bevat voor het SV40 grote T antigeen en neomycine resistentie. Deze genetische modificatie zorgt niet alleen voor resistentie tegen bepaalde antibiotica, maar bevordert ook de continue groei van de cellen door hun celcyclusregulatie te veranderen, waardoor de Hayflick-limiet, typisch voor primaire cellen, wordt omzeild. Dit proces van immortalisatie stelt de cellen in staat om hun proliferatieve capaciteit te behouden met behoud van de belangrijkste fenotypische kenmerken van spermatogonia.

Fenotypisch vertoont de GC-1 spg cellijn kenmerken die indicatief zijn voor een overgangsstadium tussen type B spermatogonia en primaire spermatocyten, waardoor het een bijzonder relevant model is voor het bestuderen van de vroege stadia van spermatogenese. De cellen brengen twee testis-specifieke isoproteïnen tot expressie: cytochroom c en lactaatdehydrogenase C4. Deze markers zijn cruciaal voor het bestuderen van celmetabolisme en energiebeheer tijdens spermatogenese, omdat ze de unieke metabolische routes weerspiegelen die actief zijn in kiemcellen. De expressie van deze specifieke isoproteïnen onderstreept het nut van de cellijn voor het onderzoeken van de biochemische en fysiologische aspecten van testiculaire celfunctie en ontwikkeling.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring