GC-1 spg

La línea celular GC-1 spg se inmortalizó mediante transfección con el plásmido pSV3-neo, que alberga las secuencias codificadoras del antígeno SV40 gran T y la resistencia a la neomicina. Esta modificación genética no sólo proporciona resistencia a ciertos antibióticos, sino que también promueve el crecimiento continuo de las células al alterar la regulación de su ciclo celular, eludiendo así el límite de Hayflick típico de las células primarias. Este proceso de inmortalización permite a las células mantener su capacidad proliferativa al tiempo que conservan características fenotípicas clave de las espermatogonias.

Fenotípicamente, la línea celular GC-1 spg presenta características que son indicativas de una etapa de transición entre la espermatogonia tipo B y los espermatocitos primarios, lo que la convierte en un modelo especialmente relevante para el estudio de las primeras etapas de la espermatogénesis. Las células expresan dos isoproteínas específicas de los testículos: el citocromo c y la lactato deshidrogenasa C4. Estos marcadores son cruciales para estudiar el metabolismo celular y la gestión de la energía durante la espermatogénesis, ya que reflejan las vías metabólicas únicas activas en las células germinales. La expresión de estas isoproteínas específicas subraya la utilidad de la línea celular para explorar los aspectos bioquímicos y fisiológicos de la función y el desarrollo de las células testiculares.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía