GC-1 spg

La línea celular GC-1 spg se inmortalizó mediante la transfección con el plásmido pSV3-neo, que contiene las secuencias codificantes del antígeno T grande del SV40 y la resistencia a la neomicina. Esta modificación genética no solo proporciona resistencia a ciertos antibióticos, sino que también promueve el crecimiento continuo de las células al alterar la regulación de su ciclo celular, eludiendo así el límite de Hayflick típico de las células primarias. Este proceso de inmortalización permite que las células mantengan su capacidad proliferativa al tiempo que conservan características fenotípicas clave de las espermatogonias.

Fenotípicamente, la línea celular GC-1 spg presenta características indicativas de una etapa de transición entre las espermatogonias tipo B y los espermatocitos primarios, lo que la convierte en un modelo especialmente relevante para estudiar las primeras etapas de la espermatogénesis. Las células expresan dos isoproteínas específicas de los testículos: el citocromo c y la lactato deshidrogenasa C4. Estos marcadores son cruciales para estudiar el metabolismo celular y la gestión de la energía durante la espermatogénesis, ya que reflejan las vías metabólicas únicas que están activas en las células germinales. La expresión de estas isoproteínas específicas subraya la utilidad de la línea celular para explorar los aspectos bioquímicos y fisiológicos de la función y el desarrollo de las células testiculares.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.