Skip to content
GC-1 spg
Tissue
อัณฑะ
Synonyms
GC-1spg, GC-1, GC1-SPG

Documents

GC-1 spg

Cell line · Product number 300375

The GC-1 spg cell line was immortalized through transfection with the pSV3-neo plasmid, which harbors the coding sequences for the SV40 large T antigen an...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ GC-1 spg ถูกทำให้เป็นอมตะผ่านการถ่ายโอนพลาสมิด pSV3-neo ซึ่งบรรจุลำดับรหัสสำหรับแอนติเจน T ขนาดใหญ่ของ SV40 และความต้านทานต่อนีโอมัยซินการดัดแปลงพันธุกรรมนี้ไม่เพียงแต่ให้ความต้านทานต่อยาปฏิชีวนะบางชนิดเท่านั้น แต่ยังส่งเสริมการเจริญเติบโตอย่างต่อเนื่องของเซลล์โดยการเปลี่ยนแปลงการควบคุมวัฏจักรของเซลล์ ทำให้สามารถข้ามขีดจำกัดของเฮย์ฟลิคที่พบในเซลล์ต้นกำเนิดได้ กระบวนการทำให้เซลล์เป็นอมตะนี้ช่วยให้เซลล์สามารถรักษาความสามารถในการแบ่งตัวได้พร้อมกับคงลักษณะทางฟีโนไทป์ที่สำคัญของเซลล์สเปิร์โมโกเนียไว้

ในเชิงฟีโนไทป์ สายเซลล์ GC-1 spg แสดงลักษณะที่บ่งชี้ถึงระยะเปลี่ยนผ่านระหว่างสเปอร์มาโตโกเนียชนิด B และสเปอร์มาโตไซต์ปฐมภูมิ ทำให้เป็นแบบจำลองที่มีความเกี่ยวข้องเป็นพิเศษสำหรับการศึกษาช่วงเริ่มต้นของกระบวนการสร้างอสุจิเซลล์เหล่านี้แสดงโปรตีนไอโซไทป์เฉพาะของอัณฑะสองชนิด ได้แก่ ไซโตโครม c และแลคเตทดีไฮโดรจีเนส C4 ตัวบ่งชี้เหล่านี้มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการศึกษาการเผาผลาญของเซลล์และการจัดการพลังงานระหว่างการสร้างสเปิร์ม ซึ่งสะท้อนถึงเส้นทางการเผาผลาญที่เป็นเอกลักษณ์ซึ่งทำงานในเซลล์สืบพันธุ์ การแสดงออกของโปรตีนไอโซไทป์เฉพาะเหล่านี้เน้นย้ำถึงประโยชน์ของสายพันธุ์เซลล์นี้ในการสำรวจแง่มุมทางชีวเคมีและสรีรวิทยาของการทำงานและการพัฒนาของเซลล์อัณฑะ

Tissue
อัณฑะ
Applications
การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ
Synonyms
  • GC-1spg
  • GC-1
  • GC1-SPG

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine testis cell line (GC-1 spg) contains an SV40 T-Antigen expression plasmid (pSV3neo) including a Tn5-neo resistance marker, supporting immortalization. The construct is stably integrated into mouse spermatogonial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Cell type
สเปิร์มาโทไซต์

04Identifiers

Citation
GC-1 spg (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300375)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_8872

05Expression and susceptibility

Viruses
ทรานส์ฟอร์แมนท์: ไวรัสซิเมียนไวรัส 40 (SV40) ทีแอนติเจน

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
10 วัน