Skip to content
GC-1 spg
Tissue
אשך
Synonyms
GC-1spg, GC-1, GC1-SPG

Documents

GC-1 spg

Cell line · Product number 300375

The GC-1 spg cell line was immortalized through transfection with the pSV3-neo plasmid, which harbors the coding sequences for the SV40 large T antigen an...

US$550.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים GC-1 spg הונצח באמצעות טרנספקציה עם הפלסמיד pSV3-neo, המכיל את רצפי הקוד של האנטיגן T הגדול SV40 ועמידות לניאומיצין. שינוי גנטי זה לא רק מספק עמידות לאנטיביוטיקות מסוימות, אלא גם מקדם את הצמיחה המתמשכת של התאים על ידי שינוי ויסות מחזור התאים שלהם, ובכך עוקף את מגבלת הייפליק האופיינית לתאים ראשוניים. תהליך הנצחה זה מאפשר לתאים לשמור על יכולת התרבות תוך שמירה על מאפיינים פנוטיפיים מרכזיים של זרעונים.

מבחינה פנוטיפית, קו התאים GC-1 spg מציג מאפיינים המעידים על שלב מעבר בין spermatogonia מסוג B לבין spermatocytes ראשוניים, מה שהופך אותו למודל רלוונטי במיוחד לחקר השלבים המוקדמים של spermatogenesis. התאים מבטאים שני איזופרוטאינים ספציפיים לאשכים: ציטוכרום C ולקטט דהידרוגנאז C4. סמנים אלה חיוניים לחקר חילוף החומרים התאי וניהול האנרגיה במהלך הספרמטוגנזה, ומשקפים את מסלולי חילוף החומרים הייחודיים הפעילים בתאי המין. הביטוי של איזופרוטאינים ספציפיים אלה מדגיש את התועלת של קו התאים בחקר ההיבטים הביוכימיים והפיזיולוגיים של תפקוד והתפתחות תאי האשכים.

Tissue
אשך
Applications
תרבות תאים תלת-ממדית
Synonyms
  • GC-1spg
  • GC-1
  • GC1-SPG

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine testis cell line (GC-1 spg) contains an SV40 T-Antigen expression plasmid (pSV3neo) including a Tn5-neo resistance marker, supporting immortalization. The construct is stably integrated into mouse spermatogonial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
אפיתל
Cell type
ספרוציט

04Identifiers

Citation
GC-1 spg (מספר קטלוגי Cytion 300375)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_8872

05Expression and susceptibility

Viruses
טרנספורמנט: אנטיגן T של נגיף סימיאן 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
10 ימים