Skip to content
GC-1 spg
Tissue
Tinh hoàn
Synonyms
GC-1spg, GC-1, GC1-SPG

Documents

GC-1 spg

Cell line · Product number 300375

The GC-1 spg cell line was immortalized through transfection with the pSV3-neo plasmid, which harbors the coding sequences for the SV40 large T antigen an...

€550.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

Dòng tế bào GC-1 spg đã được bất tử hóa thông qua quá trình chuyển gen bằng plasmid pSV3-neo, chứa các trình tự mã hóa cho kháng nguyên T lớn của SV40 và khả năng kháng neomycin. Sự biến đổi di truyền này không chỉ cung cấp khả năng kháng một số kháng sinh mà còn thúc đẩy sự phát triển liên tục của tế bào bằng cách thay đổi quy trình điều hòa chu kỳ tế bào, từ đó vượt qua giới hạn Hayflick thường thấy ở các tế bào nguyên thủy. Quá trình bất tử hóa này cho phép tế bào duy trì khả năng phân chia đồng thời giữ nguyên các đặc điểm hình thái quan trọng của tế bào tinh trùng nguyên thủy.

Về mặt biểu hiện hình thái, dòng tế bào GC-1 spg thể hiện các đặc điểm cho thấy giai đoạn chuyển tiếp giữa tế bào tinh nguyên bào loại B và tế bào tinh nguyên bào sơ cấp, làm cho nó trở thành một mô hình đặc biệt phù hợp để nghiên cứu các giai đoạn đầu của quá trình sinh tinh. Các tế bào biểu hiện hai protein đặc hiệu của tinh hoàn: cytochrome c và lactate dehydrogenase C4. Các dấu hiệu này rất quan trọng trong việc nghiên cứu chuyển hóa tế bào và quản lý năng lượng trong quá trình sinh tinh, phản ánh các con đường chuyển hóa đặc biệt hoạt động trong tế bào sinh dục. Việc biểu hiện các protein đặc hiệu này nhấn mạnh tính hữu ích của dòng tế bào trong việc khám phá các khía cạnh sinh hóa và sinh lý của chức năng và phát triển của tế bào tinh hoàn.

Tissue
Tinh hoàn
Applications
văn hóa tế bào 3D
Synonyms
  • GC-1spg
  • GC-1
  • GC1-SPG

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine testis cell line (GC-1 spg) contains an SV40 T-Antigen expression plasmid (pSV3neo) including a Tn5-neo resistance marker, supporting immortalization. The construct is stably integrated into mouse spermatogonial cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Thượng bì
Cell type
Tế bào tinh trùng

04Identifiers

Citation
GC-1 spg (Số catalog Cytion 300375)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_8872

05Expression and susceptibility

Viruses
Biến thể: Antigen T của virus khỉ 40 (SV40)

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

08Donor

Breed / subspecies
BALB/c
Donor age
10 ngày