GC-1 spg

La linea cellulare GC-1 spg è stata immortalizzata attraverso la trasfezione con il plasmide pSV3-neo, che contiene le sequenze codificanti per l'antigene SV40 large T e la resistenza alla neomicina. Questa modifica genetica non solo fornisce resistenza ad alcuni antibiotici, ma promuove anche la crescita continua delle cellule alterando la regolazione del ciclo cellulare, aggirando così il limite di Hayflick tipico delle cellule primarie. Questo processo di immortalizzazione consente alle cellule di mantenere la capacità proliferativa, pur conservando le caratteristiche fenotipiche chiave degli spermatogoni.

Dal punto di vista fenotipico, la linea cellulare GC-1 spg presenta caratteristiche indicative di uno stadio di transizione tra gli spermatogoni di tipo B e gli spermatociti primari, che la rendono un modello particolarmente importante per lo studio delle prime fasi della spermatogenesi. Le cellule esprimono due isoproteine specifiche del testicolo: il citocromo c e la lattato deidrogenasi C4. Questi marcatori sono fondamentali per lo studio del metabolismo cellulare e della gestione dell'energia durante la spermatogenesi, in quanto riflettono le vie metaboliche uniche attive nelle cellule germinali. L'espressione di queste isoproteine specifiche sottolinea l'utilità della linea cellulare nell'esplorazione degli aspetti biochimici e fisiologici della funzione e dello sviluppo delle cellule testicolari.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia