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- Sein, glande mammaire
- Maladie
- Adénocarcinome du sein
- Site métastatique
- Épanchement péricardique
- Synonymes
- MDA-Kb2
Documents
MDA-kb2
Cell line · Référence du produit 305108
La lignée cellulaire MDA-kb2 est une lignée cellulaire de cancer du sein humain issue d'une patiente adulte. Ces cellules sont négatives pour les récepteurs d'œstrogènes (ER) et les récepteurs d'androgènes...
Personnalisation / Recommandations
- MDA-kb2Cell line€430.00
Recommandé (lot le plus récent)
01Informations générales
- Description
La lignée cellulaire MDA-kb2 est une lignée cellulaire de cancer du sein humain dérivée d'une patiente adulte. Ces cellules sont négatives pour les récepteurs des œstrogènes (ER) et positives pour les récepteurs des androgènes (AR), ce qui les rend particulièrement utiles pour les études portant sur les voies de signalisation des androgènes et leur rôle dans le cancer du sein. La lignée cellulaire MDA-kb2 a été dérivée de la lignée cellulaire de cancer du sein MDA-MB-453 par transfection stable avec un construct génétique rapporteur MMTV-Luc-neo (virus de la tumeur mammaire de la souris). Cette modification génétique permet d'utiliser les cellules MDA-kb2 dans des bioessais évaluant les activités androgéniques et anti-androgéniques, où elles sont souvent employées dans des tests de reporter in-Luc en raison de leur transfection stable avec un gène rapporteur a-Luc sous le contrôle d'un promoteur sensible aux androgènes.
En raison de leur profil récepteur spécifique, les cellules MDA-kb2 constituent un modèle crucial pour étudier le rôle des androgènes dans la progression du cancer du sein et pour tester l'efficacité d'agents thérapeutiques potentiels ciblant les voies de l'AR. Ces cellules sont cultivées dans un milieu Leibovitz L-15 complété par 10 % de sérum fœtal bovin, dans des conditions ne nécessitant pas d'apport en CO₂, ce qui constitue une caractéristique atypique par rapport à de nombreuses autres lignées cellulaires. Les propriétés uniques des cellules MDA-kb2 en font un outil indispensable tant pour la recherche fondamentale que pour le développement pharmaceutique, en particulier pour comprendre les interactions des récepteurs hormonaux dans le cancer du sein.
- Tissu
- Sein, glande mammaire
- Maladie
- Adénocarcinome du sein
- Site métastatique
- Épanchement péricardique
- Synonymes
- MDA-Kb2
02Classification
- Organisme
- Humain
- Sexe
- Femme
- Propriétés de croissance
- Adepte
- Statut OGM
- GMO-S1
- Informations détaillées sur le statut OGM
- GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Niveau de biosécurité
- 1
03Caractéristiques
- Morphologie
- Épithéliale
04Identifiants
- Référence
- MDA-kb2 (numéro de catalogue Cytion 305108)
- Numéro d'identification fiscale NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6421
05Expression et sensibilité
- Expression des protéines
- Cette lignée cellulaire exprime la protéine Luc de luciole sous le contrôle du promoteur MMTV, qui contient des éléments de réponse à la fois pour les récepteurs des glucocorticoïdes (GR) et pour les récepteurs des androgènes (AR)
06Manipulation et culture
- Milieu de culture
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
- Atmosphère d'incubation
37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.
- Compléments alimentaires
- Compléter le milieu avec 10% de FBS
- Réactif de dissociation
- Accutase
- Repiquage
- Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
- Renouvellement des fluides
- 2 à 3 fois par semaine
- Décongélation et mise en culture
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Contrôle qualité et cryoconservation
- Stérilité
La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.
Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.
- Milieu de congélation
- Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
- Conditions de stockage
Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.
- Conditions de livraison
Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.
08Donateur
- Âge du donneur
- 48 ans
09Aspects juridiques et sécurité
- Consignes de sécurité
- Lorsque l'on envisage de stocker un cryovial dans l'azote liquide en vue d'une décongélation ultérieure, il est obligatoire de respecter des mesures de sécurité rigoureuses. Des gants et des vêtements de protection appropriés sont indispensables, et l'utilisation d'un masque facial ou de lunettes de sécurité est requise pendant le transfert des échantillons congelés vers ou depuis le réservoir d'azote liquide. Ceci afin de réduire le risque de blessures dues à l'explosion potentielle des cryoviaux lors de leur retrait, qui peut entraîner la projection de fragments tranchants.
- Garantie
Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit
Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie
- Un accord de transfert de matériel est requis
- Oui