Mine otse sisu juurde
MDA-kb2
Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Rinna adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Perikardiaväljaheide
Sünonüümid
MDA-Kb2

Dokumendid

MDA-kb2

Cell line · Toote number 305108

MDA-kb2 rakuliin on täiskasvanud patsiendilt saadud inimese rinnavähi rakuliin. Need rakud on östrogeeniretseptori (ER) negatiivsed ja androgeeniretseptori...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

MDA-kb2 rakuliin on täiskasvanud patsiendilt saadud inimese rinnavähi rakuliin. Need rakud on östrogeeniretseptori (ER) negatiivsed ja androgeeniretseptori (AR) positiivsed, mistõttu on need väärtuslikud uuringutes, mis käsitlevad androgeeni signaaliteid ja nende mõju rinnavähile. MDA-kb2 rakuliin saadi rinnavähi rakuliinist MDA-MB-453 stabiilse transfektsiooni teel hiire rinnavähi viiruse (MMTV)-Luc-neo reportergeeni konstruktiga. See geneetiline modifikatsioon võimaldab kasutada MDA-kb2 rakke androgeense ja antiandrogeense aktiivsuse biotestides, kus neid kasutatakse sageli in-Luc reporteranalüüsides tänu nende stabiilsele transfektsioonile a-Luc reportergeeniga androgeenile reageeriva promootori kontrolli all.

Tänu oma spetsiifilisele retseptoriprofiilile pakuvad MDA-kb2 rakud olulist mudelit androgeenide rolli uurimiseks rinnavähi progresseerumisel ning AR-signaaliteid sihtivate potentsiaalsete ravimite efektiivsuse testimiseks. Neid rakke kasvatatakse Leibovitz'i L-15 keskkonnas, millele on lisatud 10% loote veise seerumit, tingimustes, mis ei vaja CO2 lisamist, mis on ebatüüpiline omadus võrreldes paljude teiste rakuliinidega. MDA-kb2 rakkude unikaalsed omadused muudavad need asendamatuks vahendiks nii alusuuringutes kui ka ravimiarenduses, eriti rinnavähi hormoonretseptorite vastasmõju mõistmisel.

Kude
Rind, rinnanäärme
Haigus
Rinna adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Perikardiaväljaheide
Sünonüümid
  • MDA-Kb2

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Naine
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
MDA-kb2 (Cytioni katalooginumber 305108)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
See rakuliin ekspresseerib firefly-Luc-i MMTV-promootori kontrolli all, mis sisaldab nii glükokortikoidiretseptorite (GR) kui ka androgeeniretseptorite (AR) vastuselementide

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
48 aastat