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MDA-kb2
ティッシュ
乳房、乳腺
病気
乳房腺がん
転移部位
心嚢液貯留
同義語
MDA-Kb2

MDA-kb2

Cell line · 製品番号 305108

MDA-kb2細胞株は、成人患者由来のヒト乳がん細胞株である。これらの細胞はエストロゲン受容体(ER)陰性であり、アンドロゲン受容体...

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01概要

説明

MDA-kb2細胞株は、成人患者由来のヒト乳がん細胞株である。これらの細胞はエストロゲン受容体(ER)陰性かつアンドロゲン受容体(AR)陽性であり、アンドロゲンシグナル伝達経路および乳がんにおけるその関与に関する研究において有用である。 MDA-kb2細胞株は、乳がん細胞株MDA-MB-453に、マウス乳がんウイルス(MMTV)-Luc-neoレポーター遺伝子構築体を安定的に導入することで樹立された。 この遺伝子改変により、MDA-kb2細胞はアンドロゲン活性および抗アンドロゲン活性のバイオアッセイに使用可能となり、アンドロゲン応答性プロモーターの制御下にあるLucレポーター遺伝子の安定トランスフェクションが行われていることから、Lucレポーターアッセイで頻繁に利用されています。

MDA-kb2 細胞は、その特異的な受容体プロファイルにより、乳がんの進行におけるアンドロゲンの役割を調査し、AR 経路を標的とする潜在的な治療薬の有効性を試験するための重要なモデルを提供します。これらの細胞は、10% の胎児牛血清を添加した Leibovitz's L-15 培地で培養され、CO2 補給を必要としない条件下で培養されます。これは、他の多くの細胞株と比較して非典型的な特性です。 MDA-kb2細胞のこれらのユニークな特性は、特に乳がんにおけるホルモン受容体の相互作用の解明において、基礎研究および医薬品開発の両方において不可欠なツールとなっています。

ティッシュ
乳房、乳腺
病気
乳房腺がん
転移部位
心嚢液貯留
同義語
  • MDA-Kb2

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮

04識別子

引用
MDA-kb2(Cytion カタログ番号 305108)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_6421

05発現と感受性

タンパク質の発現
この細胞株は、グルココルチコイド受容体(GR)およびアンドロゲン受容体(AR)の両方の応答要素を含むMMTVプロモーターの制御下で、ホタルルシフェラーゼ(firefly-Luc)を発現する。

06取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
48年