Prejsť na obsah
MDA-kb2
Tkanivo
Prsia, mliečna žľaza
Choroba
Adenokarcinóm prsníka
Miesto metastáz
Perikardiálny výpotok
Synonymá
MDA-Kb2

Dokumenty

MDA-kb2

Cell line · Číslo výrobku 305108

Buněčná línia MDA-kb2 je ľudská buněčná línia rakoviny prsníka získaná od dospelého pacienta. Tieto bunky sú negatívne na estrogénový receptor (ER) a androgénový receptor...

€430.00bez DPH a poštovného

Prispôsobenie / Odporúčania

Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunka MDA-kb2 je ľudská bunka rakoviny prsníka získaná od dospelého pacienta. Tieto bunky sú negatívne na estrogénový receptor (ER) a pozitívne na androgénový receptor (AR), čo z nich robí cenný materiál pre štúdie zamerané na androgénové signálne dráhy a ich vplyv na rakovinu prsníka. Bunka MDA-kb2 bola odvodená z bunky rakoviny prsníka MDA-MB-453 stabilnou transfekciou konštruktom reportérového génu myšieho mliečneho nádorového vírusu (MMTV)-Luc-neo. Táto genetická modifikácia umožňuje použitie buniek MDA-kb2 v biologických testoch na androgénnu a antiandrogénnu aktivitu, kde sa často využívajú v testoch s Luc-reporterom vďaka ich stabilnej transfekcii s a-Luc-reporterovým génom pod kontrolou promotora citlivého na androgény.

Vďaka svojmu špecifickému profilu receptorov poskytujú bunky MDA-kb2 kľúčový model na skúmanie úlohy androgénov v progresi rakoviny prsníka a na testovanie účinnosti potenciálnych terapeutických látok zameraných na AR dráhy. Tieto bunky sa kultivujú v Leibovitzovom médiu L-15 doplnenom o 10 % fetálneho bovinného séra, za podmienok, ktoré nevyžadujú dopĺňanie CO2, čo je v porovnaní s mnohými inými bunkovými líniami atypická charakteristika. Vďaka svojim jedinečným vlastnostiam sú bunky MDA-kb2 nenahraditeľným nástrojom v základnom výskume aj vo farmaceutickom vývoji, najmä pri skúmaní interakcií hormónových receptorov pri rakovine prsníka.

Tkanivo
Prsia, mliečna žľaza
Choroba
Adenokarcinóm prsníka
Miesto metastáz
Perikardiálny výpotok
Synonymá
  • MDA-Kb2

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové

04Identifikátory

Citácia
MDA-kb2 (katalógové číslo Cytion 305108)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
Táto bunková línia exprimuje gén firefly-Luc pod kontrolou promotora MMTV, ktorý obsahuje responzívne elementy pre glukokortikoidové receptory (GR) aj androgénové receptory (AR)

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
48 rokov