Pāriet uz saturu
MDA-kb2
Audums
Krūtis, krūts dziedzeris
Slimība
Krūts adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Perikarda izsvīdums
Sinonīmi
MDA-Kb2

Dokumenti

MDA-kb2

Cell line · Preces numurs 305108

MDA-kb2 šūnu līnija ir cilvēka krūts vēža šūnu līnija, kas iegūta no pieauguša pacienta. Šīs šūnas ir estrogēna receptoru (ER) negatīvas un androgēnu receptoru...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

MDA-kb2 šūnu līnija ir cilvēka krūts vēža šūnu līnija, kas iegūta no pieaugušā pacienta. Šīs šūnas ir estrogēnu receptoru (ER) negatīvas un androgēnu receptoru (AR) pozitīvas, tādēļ tās ir vērtīgas pētījumos, kas saistīti ar androgēnu signālceļiem un to ietekmi uz krūts vēzi. MDA-kb2 šūnu līnija tika iegūta no krūts vēža šūnu līnijas MDA-MB-453, veicot stabilu transfekciju ar peles piena dziedzera audzēja vīrusa (MMTV)-Luc-neo reportergēna konstruktu. Šī ģenētiskā modifikācija ļauj izmantot MDA-kb2 šūnas bioanalīzēs androgēnās un antiandrogēnās aktivitātes noteikšanai, kur tās bieži izmanto in-Luc reporteru analīzēs, pateicoties to stabilai transfekcijai ar a-Luc reportergēnu androgēniem reaģējoša promotora kontrolē.

Pateicoties to specifiskajam receptoru profilam, MDA-kb2 šūnas nodrošina būtisku modeli androgēnu lomas izpētei krūts vēža progresēšanā un potenciālo terapeitisko līdzekļu, kas vērsti uz AR ceļiem, efektivitātes pārbaudīšanai. Šīs šūnas tiek kultivētas Leibovitz L-15 barotnē, kam pievienots 10 % teļa serums, apstākļos, kas neprasa CO2 papildināšanu, kas ir netipiska īpašība salīdzinājumā ar daudzām citām šūnu līnijām. MDA-kb2 šūnu unikālās īpašības padara tās par neaizstājamu rīku gan pamatpētniecībā, gan farmaceitisko līdzekļu izstrādē, jo īpaši, lai izprastu hormonu receptoru mijiedarbību krūts vēža gadījumā.

Audums
Krūtis, krūts dziedzeris
Slimība
Krūts adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Perikarda izsvīdums
Sinonīmi
  • MDA-Kb2

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
MDA-kb2 (Cytion kataloga numurs 305108)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Šī šūnu līnija ekspresē firefly-Luc gēnu MMTV promotora kontrolē, kurā ir atbildes elementi gan glikokortikoīdu receptoriem (GR), gan androgēnu receptoriem (AR)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
48 gadi