Přejít na obsah
MDA-kb2
Tkáň
Prsa, mléčná žláza
Nemoc
Adenokarcinom prsu
Místo metastázy
Perikardiální výpotek
Synonyma
MDA-Kb2

Dokumenty

MDA-kb2

Cell line · Číslo výrobku 305108

Buněčná linie MDA-kb2 je lidská buněčná linie rakoviny prsu odvozená od dospělé pacientky. Tyto buňky jsou negativní na estrogenové receptory (ER) a androgenové receptory...

€430.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie MDA-kb2 je lidská buněčná linie rakoviny prsu odvozená od dospělé pacientky. Tyto buňky jsou negativní na estrogenový receptor (ER) a pozitivní na androgenový receptor (AR), což z nich činí cenný materiál pro studie zabývající se signálními drahami androgenů a jejich vlivem na rakovinu prsu. Buněčná linie MDA-kb2 byla odvozena z buněčné linie rakoviny prsu MDA-MB-453 stabilní transfekcí konstruktem reportérového genu myšího prsního nádorového viru (MMTV)-Luc-neo. Tato genetická modifikace umožňuje použití buněk MDA-kb2 v biologických testech androgenní a antiandrogenní aktivity, kde se často využívají v testech s Luc-reporterem díky stabilní transfekci s a-Luc-reporterovým genem pod kontrolou promotoru reagujícího na androgeny.

Díky svému specifickému profilu receptorů představují buňky MDA-kb2 klíčový model pro zkoumání role androgenů v progresi rakoviny prsu a pro testování účinnosti potenciálních terapeutických látek zaměřených na AR dráhy. Tyto buňky se kultivují v Leibovitzově médiu L-15 doplněném 10 % fetálního bovinního séra, za podmínek, které nevyžadují doplňování CO2, což je ve srovnání s mnoha jinými buněčnými liniemi atypická vlastnost. Díky svým jedinečným vlastnostem jsou buňky MDA-kb2 nepostradatelným nástrojem jak v základním výzkumu, tak ve farmaceutickém vývoji, zejména při porozumění interakcím hormonálních receptorů u rakoviny prsu.

Tkáň
Prsa, mléčná žláza
Nemoc
Adenokarcinom prsu
Místo metastázy
Perikardiální výpotek
Synonyma
  • MDA-Kb2

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GMO
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
MDA-kb2 (katalogové číslo Cytion 305108)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Tato buněčná linie exprimuje gen firefly-Luc pod kontrolou promotoru MMTV, který obsahuje signální sekvence pro glukokortikoidové receptory (GR) i androgenní receptory (AR)

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-Glutaminu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
48 let