Gå til innholdet
MDA-kb2
Vev
Bryst, brystkjertel
Sykdom
Adenokarsinom i bryst
Metastaseområde
Perikardial effusjon
Synonymer
MDA-Kb2

Dokumenter

MDA-kb2

Cell line · Produktnummer 305108

MDA-kb2-cellelinjen er en human brystkreftcellelinje som stammer fra en voksen pasient. Disse cellene er østrogenreseptor (ER)-negative og androgenreseptor...

€430.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

MDA-kb2-cellelinjen er en human brystkreftcellelinje som stammer fra en voksen pasient. Disse cellene er østrogenreseptor-negative (ER-) og androgenreseptor-positive (AR+), noe som gjør dem verdifulle for studier av androgensignalveier og deres betydning for brystkreft. MDA-kb2-cellelinjen ble avledet fra brystkreftcellelinjen MDA-MB-453 ved stabil transfeksjon med et musemammatumorvirus (MMTV)-Luc-neo-reportergenkonstrukt. Denne genetiske modifikasjonen gjør det mulig å bruke MDA-kb2-celler i bioassays for androgene og antiandrogene aktiviteter, hvor de ofte benyttes i -Luc-reporterassays på grunn av deres stabile transfeksjon med et -Luc-reportergen under kontroll av en androgenresponsiv promotor.

På grunn av deres spesifikke reseptorprofil utgjør MDA-kb2-celler en avgjørende modell for å undersøke androgeners rolle i brystkreftprogresjon og for å teste effekten av potensielle terapeutiske midler rettet mot AR-signalveier. Disse cellene dyrkes i Leibovitz's L-15-medium tilsatt 10 % føtal bovint serum, under forhold som ikke krever CO2-tilskudd, noe som er et atypisk trekk sammenlignet med mange andre cellelinjer. De unike egenskapene til MDA-kb2-celler gjør dem til et uunnværlig verktøy både i grunnforskning og farmasøytisk utvikling, særlig for å forstå hormonreseptorinteraksjoner i brystkreft.

Vev
Bryst, brystkjertel
Sykdom
Adenokarsinom i bryst
Metastaseområde
Perikardial effusjon
Synonymer
  • MDA-Kb2

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MDA-kb2 (Cytion katalognummer 305108)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05Uttrykk og mottakelighet

Proteinekspresjon
Cellelinjen uttrykker firefly-Luc under kontroll av MMTV-promotoren, som inneholder responselementer for både glukokortikoidreseptorer (GR) og androgenreseptorer (AR)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
48 år