İçeriğe atla
MDA-kb2
Doku
Meme, Meme bezi
Hastalık
Meme adenokarsinomu
Metastaz yeri
Perikardiyal efüzyon
Eş anlamlılar
MDA-Kb2

MDA-kb2

Cell line · Ürün numarası 305108

MDA-kb2 hücre hattı, yetişkin bir hastadan elde edilen bir insan meme kanseri hücre hattıdır. Bu hücreler östrojen reseptörü (ER) negatif olup, androjen reseptörü...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

MDA-kb2 hücre hattı, yetişkin bir hastadan elde edilen bir insan meme kanseri hücre hattıdır. Bu hücreler östrojen reseptörü (ER) negatif ve androjen reseptörü (AR) pozitif olup, bu özellikleri sayesinde androjen sinyal yolaklarını ve bunların meme kanserindeki etkilerini inceleyen çalışmalar için değerli bir kaynak oluşturmaktadır. MDA-kb2 hücre hattı, fare meme tümör virüsü (MMTV)-Luc-neo raportör gen konstrüksiyonu ile stabil transfeksiyon yoluyla meme kanseri hücre hattı MDA-MB-453'ten türetilmiştir. Bu genetik modifikasyon, MDA-kb2 hücrelerinin androjenik ve anti-androjenik aktiviteler için biyolojik testlerde kullanılmasını sağlar; bu hücreler, androjene duyarlı bir promotörün kontrolü altındaki a-Luc raportör geni ile stabil transfeksiyonu nedeniyle genellikle in-Luc raportör testlerinde kullanılır.

Spesifik reseptör profilleri nedeniyle, MDA-kb2 hücreleri, meme kanseri ilerlemesinde androjenlerin rolünü araştırmak ve AR yolaklarını hedefleyen potansiyel terapötik ajanların etkinliğini test etmek için çok önemli bir model sağlar. Bu hücreler, %10 fetal sığır serumu ile takviye edilmiş Leibovitz's L-15 besiyerinde, CO2 takviyesi gerektirmeyen koşullar altında kültürlenir; bu, diğer birçok hücre hattına kıyasla atipik bir özelliktir. MDA-kb2 hücrelerinin benzersiz özellikleri, onları hem temel araştırma hem de ilaç geliştirme alanında, özellikle de meme kanserinde hormon reseptör etkileşimlerini anlamada vazgeçilmez bir araç haline getirir.

Doku
Meme, Meme bezi
Hastalık
Meme adenokarsinomu
Metastaz yeri
Perikardiyal efüzyon
Eş anlamlılar
  • MDA-Kb2

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
MDA-kb2 (Cytion katalog numarası 305108)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05İfade ve duyarlılık

Protein ekspresyonu
Bu hücre hattı, hem glukokortikoid reseptörleri (GR) hem de androjen reseptörleri (AR) için yanıt elemanları içeren MMTV promotörünün kontrolü altında ateşböceği-Luc'u eksprese eder

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
48 yıl