Ga naar de inhoud
MDA-kb2
Weefsel
Borst, Borstklier
Ziekte
Borstadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pericardiale effusie
Synoniemen
MDA-Kb2

Documenten

MDA-kb2

Cell line · Productnummer 305108

De MDA-kb2-cellijn is een menselijke borstkankercellijn die afkomstig is van een volwassen patiënt. Deze cellen zijn oestrogeenreceptor (ER)-negatief en androgeenreceptor...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De MDA-kb2-cellijn is een menselijke borstkankercellijn die is afgeleid van een volwassen patiënt. Deze cellen zijn oestrogeenreceptor (ER)-negatief en androgeenreceptor (AR)-positief, waardoor ze waardevol zijn voor onderzoek naar androgeensignaalroutes en de implicaties daarvan voor borstkanker. De MDA-kb2-cellijn is afgeleid van de borstkankercellijn MDA-MB-453 door stabiele transfectie met een muis-mammair-tumorvirus (MMTV)-Luc-neo-reportergenconstruct. Deze genetische modificatie maakt het mogelijk om MDA-kb2-cellen te gebruiken in bioassays voor androgene en anti-androgene activiteiten, waarbij ze vaak worden ingezet in -Luc-reporterassays vanwege hun stabiele transfectie met een -Luc-reportergen onder de controle van een androgeen-responsieve promotor.

Vanwege hun specifieke receptorprofiel vormen MDA-kb2-cellen een cruciaal model voor het onderzoeken van de rol van androgenen in de progressie van borstkanker en voor het testen van de werkzaamheid van potentiële therapeutische middelen die gericht zijn op AR-routes. Deze cellen worden gekweekt in Leibovitz's L-15-medium, aangevuld met 10% foetaal runderserum, onder omstandigheden die geen CO2-toevoeging vereisen, wat een atypisch kenmerk is in vergelijking met veel andere cellijnen. De unieke eigenschappen van MDA-kb2-cellen maken ze tot een onmisbaar hulpmiddel in zowel fundamenteel onderzoek als farmaceutische ontwikkeling, met name voor het begrijpen van hormoonreceptorinteracties bij borstkanker.

Weefsel
Borst, Borstklier
Ziekte
Borstadenocarcinoom
Plaats van uitzaaiingen
Pericardiale effusie
Synoniemen
  • MDA-Kb2

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
MDA-kb2 (Cytion catalogusnummer 305108)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
De cellijn brengt vuurvlieg-Luc tot expressie onder controle van de MMTV-promotor, die responselementen bevat voor zowel glucocorticoïdreceptoren (GR) als androgeenreceptoren (AR)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
48 jaar