MDA-kb2

La línea celular MDA-kb2 es una línea celular de cáncer de mama humano derivada de una paciente adulta. Estas células son negativas para el receptor de estrógeno (ER) y positivas para el receptor de andrógenos (AR), lo que las hace muy útiles para estudios relacionados con las vías de señalización de los andrógenos y sus implicaciones en el cáncer de mama. La línea celular MDA-kb2 se derivó de la línea celular de cáncer de mama MDA-MB-453 mediante transfección estable con un constructo del gen reportero MMTV-Luc-neo (virus del tumor mamario de ratón). Esta modificación genética permite el uso de células MDA-kb2 en bioensayos para actividades androgénicas y antiandrogénicas, donde a menudo se utilizan en ensayos con reportero Luc debido a su transfección estable con el gen reportero a-Luc bajo el control de un promotor sensible a los andrógenos.

Debido a su perfil específico de receptores, las células MDA-kb2 constituyen un modelo crucial para investigar el papel de los andrógenos en la progresión del cáncer de mama y para evaluar la eficacia de posibles agentes terapéuticos dirigidos a las vías del AR. Estas células se cultivan en medio Leibovitz L-15 suplementado con un 10 % de suero fetal bovino, en condiciones que no requieren suplementación _con CO_₂, lo que constituye una característica atípica en comparación con muchas otras líneas celulares. Las propiedades únicas de las células MDA-kb2 las convierten en una herramienta indispensable tanto en la investigación básica como en el desarrollo farmacéutico, especialmente para comprender las interacciones de los receptores hormonales en el cáncer de mama.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía