Tartalomra ugrás
MDA-kb2
Szövet
Mell, Emlőmirigy
Betegség
Mell adenokarcinóma
Áttétes hely
Perikardiális folyadékgyülem
Szinonimák
MDA-Kb2

Dokumentumok

MDA-kb2

Cell line · Termékszám 305108

Az MDA-kb2 sejtvonal egy felnőtt betegből nyert emberi emlőrák-sejtvonal. Ezek a sejtek ösztrogénreceptor (ER)-negatívak, és az androgénreceptor...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az MDA-kb2 sejtvonal egy felnőtt betegből nyert emberi emlőrákos sejtvonal. Ezek a sejtek ösztrogénreceptor-negatívak (ER-) és androgénreceptor-pozitívak (AR+), ami értékessé teszi őket az androgén jelátviteli útvonalakat és azok emlőrákban betöltött szerepét vizsgáló kutatások számára. Az MDA-kb2 sejtvonalat az MDA-MB-453 emlőrák-sejtvonalból nyerték ki, egér emlőtumorvírus (MMTV)-Luc-neo riportergén-konstruktummal történő stabil transzfekcióval. Ez a genetikai módosítás lehetővé teszi az MDA-kb2 sejtek felhasználását androgén és antiandrogén aktivitásra vonatkozó biológiai vizsgálatokban, ahol gyakran alkalmazzák őket in-Luc riporter vizsgálatokban, mivel stabil transzfekcióval rendelkeznek az androgénre reagáló promóter által szabályozott a-Luc riporter génnel.

Specifikus receptorprofiljuknak köszönhetően az MDA-kb2 sejtek döntő jelentőségű modellt nyújtanak az androgének szerepének vizsgálatához az emlőrák progressziójában, valamint az AR-útvonalakat célzó potenciális terápiás szerek hatékonyságának teszteléséhez. Ezeket a sejteket Leibovitz L-15 táptalajban tenyésztik, 10% borjúszérummal kiegészítve, olyan körülmények között, amelyek nem igényelnek CO2-kiegészítést, ami atipikus jellemző sok más sejtvonalhoz képest. Az MDA-kb2 sejtek egyedülálló tulajdonságai miatt nélkülözhetetlen eszközzé válnak mind az alapkutatásban, mind a gyógyszerfejlesztésben, különösen az emlőrákban fellépő hormonreceptor-kölcsönhatások megértése terén.

Szövet
Mell, Emlőmirigy
Betegség
Mell adenokarcinóma
Áttétes hely
Perikardiális folyadékgyülem
Szinonimák
  • MDA-Kb2

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Nő
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis

04Azonosítók

Hivatkozás
MDA-kb2 (Cytion katalógusszám: 305108)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05Kifejeződés és fogékonyság

Fehérjeexpresszió
A sejtvonal az MMTV-promóter szabályozása alatt expresszálja a szentjánosbogár-Luc-ot, amely mind a glükokortikoid-receptorok (GR), mind az androgénreceptorok (AR) számára tartalmaz válaszelemeket

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Az adományozó életkora
48 év