
- Tissue
- Vú, Tuyến vú
- Disease
- Ung thư tuyến vú
- Metastatic site
- Tràn dịch màng tim
- Synonyms
- MDA-Kb2
Documents
MDA-kb2
Cell line · Product number 305108
The MDA-kb2 cell line is a human breast cancer cell line derived from an adult patient. These cells are estrogen receptor (ER) negative and androgen recep...
Customization / Recommendations
- MDA-kb2Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
Dòng tế bào MDA-kb2 là một dòng tế bào ung thư vú ở người được phân lập từ một bệnh nhân trưởng thành. Các tế bào này âm tính với thụ thể estrogen (ER) và dương tính với thụ thể androgen (AR), khiến chúng trở nên hữu ích cho các nghiên cứu liên quan đến các con đường truyền tín hiệu androgen và tác động của chúng đối với ung thư vú. Dòng tế bào MDA-kb2 được phân lập từ dòng tế bào ung thư vú MDA-MB-453 thông qua quá trình chuyển gen ổn định với cấu trúc gen báo cáo MMTV-Luc-neo. Sự biến đổi gen này cho phép sử dụng tế bào MDA-kb2 trong các thử nghiệm sinh học về hoạt tính androgen và chống androgen, nơi chúng thường được sử dụng trong các thử nghiệm báo cáo a-Luc do được chuyển gen ổn định với gen báo cáo a-Luc dưới sự điều khiển của một promoter đáp ứng với androgen.
Do cấu trúc thụ thể đặc trưng, tế bào MDA-kb2 cung cấp một mô hình quan trọng để nghiên cứu vai trò của androgen trong sự tiến triển của ung thư vú và để đánh giá hiệu quả của các tác nhân điều trị tiềm năng nhắm vào các con đường AR. Các tế bào này được nuôi cấy trong môi trường Leibovitz's L-15 bổ sung 10% huyết thanh bò thai, trong điều kiện không yêu cầu bổ sung CO₂, đây là một đặc điểm bất thường so với nhiều dòng tế bào khác. Các đặc tính độc đáo của tế bào MDA-kb2 khiến chúng trở thành công cụ không thể thiếu trong cả nghiên cứu cơ bản và phát triển dược phẩm, đặc biệt là trong việc hiểu rõ các tương tác của thụ thể hormone trong ung thư vú.
- Tissue
- Vú, Tuyến vú
- Disease
- Ung thư tuyến vú
- Metastatic site
- Tràn dịch màng tim
- Synonyms
- MDA-Kb2
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Thượng bì
04Identifiers
- Citation
- MDA-kb2 (mã sản phẩm Cytion 305108)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6421
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- Dòng tế bào này biểu hiện gen firefly-Luc dưới sự điều khiển của trình tự khởi động MMTV, trong đó chứa các yếu tố đáp ứng cho cả thụ thể glucocorticoid (GR) và thụ thể androgen (AR)
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM:Ham's F12 (tỷ lệ 1:1), chứa: 3,1 g/L glucose, chứa: 2,5 mM L-glutamine, chứa: 15 mM HEPES, chứa: 0,5 mM natri pyruvate, chứa: 1,2 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820400a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.
- Supplements
- Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
- Fluid renewal
- 2 đến 3 lần mỗi tuần
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.
Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.
- Freeze medium
- Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
- Storage conditions
Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.
- Shipping conditions
Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.
08Donor
- Donor age
- 48 năm
09Legal and safety
- Safety precautions
- Khi lập kế hoạch lưu trữ ống cryovial trong nitơ lỏng để rã đông sau này, việc tuân thủ các biện pháp an toàn nghiêm ngặt là bắt buộc. Găng tay và quần áo bảo hộ phù hợp là điều cần thiết, và việc sử dụng khẩu trang hoặc kính bảo hộ là bắt buộc trong quá trình chuyển mẫu đông lạnh vào hoặc ra khỏi bể nitơ lỏng. Điều này nhằm giảm thiểu nguy cơ chấn thương do nổ ống cryovial khi lấy ra, có thể dẫn đến việc văng ra các mảnh vỡ sắc nhọn.
- Warranty
Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.
Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.
- Material Transfer Agreement required
- Yes