Gå direkt till innehållet
MDA-kb2
Vävnad
Bröst, bröstkörtel
Sjukdom
Adenokarcinom i bröstet
Metastaseringsställe
Perikardiell utgjutning
Synonymer
MDA-Kb2

MDA-kb2

Cell line · Produktnummer 305108

Cellinjen MDA-kb2 är en human bröstcancercellinje som härrör från en vuxen patient. Dessa celler är östrogenreceptornegativa (ER-) och androgenreceptor...

€430.00exkl. moms och frakt

Anpassning / Rekommendationer

Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen MDA-kb2 är en human bröstcancercellinje som härstammar från en vuxen patient. Dessa celler är östrogenreceptornegativa (ER-) och androgenreceptorpositiva (AR+), vilket gör dem värdefulla för studier av androgensignaleringsvägar och deras betydelse för bröstcancer. MDA-kb2-cellinjen härstammar från bröstcancercellinjen MDA-MB-453 genom stabil transfektion med en MMTV-Luc-neo-reportergenkonstruktion. Denna genetiska modifiering möjliggör användning av MDA-kb2-celler i bioassays för androgena och antiandrogena aktiviteter, där de ofta används i -Luc-reporterassays på grund av sin stabila transfektion med ett -Luc-reportergen under kontroll av en androgenresponsiv promotor.

Tack vare sin specifika receptorprofil utgör MDA-kb2-celler en viktig modell för att undersöka androgenernas roll i bröstcancerprogression och för att testa effekten av potentiella terapeutiska medel riktade mot AR-signalvägar. Dessa celler odlas i Leibovitz L-15-medium kompletterat med 10 % fetalt bovint serum, under förhållanden som inte kräver CO2-tillförsel, vilket är en atypisk egenskap jämfört med många andra cellinjer. De unika egenskaperna hos MDA-kb2-celler gör dem till ett oumbärligt verktyg inom både grundforskning och läkemedelsutveckling, särskilt för att förstå hormonreceptorinteraktioner vid bröstcancer.

Vävnad
Bröst, bröstkörtel
Sjukdom
Adenokarcinom i bröstet
Metastaseringsställe
Perikardiell utgjutning
Synonymer
  • MDA-Kb2

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifierare

Källa
MDA-kb2 (Cytion katalognummer 305108)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05Uttryck och mottaglighet

Proteinexpression
Cellinjen uttrycker firefly-Luc under kontroll av MMTV-promotorn, som innehåller responselement för både glukokortikoidreceptorer (GR) och androgenreceptorer (AR)

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
48 år