MDA-kb2

La linea cellulare MDA-kb2 è una linea cellulare di carcinoma mammario umano derivata da una paziente adulta. Queste cellule sono negative al recettore degli estrogeni (ER) e positive al recettore degli androgeni (AR), il che le rende preziose per gli studi riguardanti le vie di segnalazione degli androgeni e le loro implicazioni nel carcinoma mammario. La linea cellulare MDA-kb2 è stata derivata dalla linea cellulare del carcinoma mammario MDA-MB-453 mediante trasfezione stabile con un costrutto genico reporter MMTV-Luc-neo (Mouse Mammary Tumor Virus). Questa modificazione genetica consente l'uso delle cellule MDA-kb2 in bioassay per le attività androgeniche e antiandrogeniche, dove sono spesso utilizzate in saggi con reporter Luc grazie alla loro trasfezione stabile con il gene reporter a-Luc sotto il controllo di un promotore sensibile agli androgeni.

Grazie al loro specifico profilo recettoriale, le cellule MDA-kb2 costituiscono un modello fondamentale per lo studio del ruolo degli androgeni nella progressione del cancro al seno e per la valutazione dell'efficacia di potenziali agenti terapeutici mirati alle vie dell'AR. Queste cellule vengono coltivate in terreno Leibovitz L-15 integrato con siero fetale bovino al 10%, in condizioni che non richiedono l'aggiunta _di CO₂, una caratteristica atipica rispetto a molte altre linee cellulari. Le proprietà uniche delle cellule MDA-kb2 le rendono uno strumento indispensabile sia nella ricerca di base che nello sviluppo farmaceutico, in particolare per comprendere le interazioni dei recettori ormonali nel cancro al seno.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia