Langsung ke isi
MDA-kb2
Tisu
Payudara, Kelenjar susu
Penyakit
Adenokarsinoma payudara
Lokasi metastasis
Efusi perikardial
Sinonim
MDA-Kb2

MDA-kb2

Cell line · Nomor produk 305108

Baris sel MDA-kb2 adalah baris sel kanker payudara manusia yang berasal dari seorang pasien dewasa. Sel-sel ini negatif terhadap reseptor estrogen (ER) dan reseptor androgen...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Baris sel MDA-kb2 adalah baris sel kanker payudara manusia yang diisolasi dari seorang pasien dewasa. Sel-sel ini negatif terhadap reseptor estrogen (ER) dan positif terhadap reseptor androgen (AR), sehingga sangat berguna untuk penelitian yang melibatkan jalur sinyal androgen dan implikasinya dalam kanker payudara. Baris sel MDA-kb2 berasal dari baris sel kanker payudara MDA-MB-453 melalui transfeksi stabil dengan konstruksi gen pelapor MMTV-Luc-neo. Modifikasi genetik ini memungkinkan penggunaan sel MDA-kb2 dalam bioassay untuk aktivitas androgenik dan anti-androgenik, di mana sel-sel ini sering digunakan dalam uji reporter a-Luc karena transfeksi stabilnya dengan gen reporter a-Luc di bawah kendali promotor yang responsif terhadap androgen.

Berkat profil reseptornya yang spesifik, sel MDA-kb2 menyediakan model krusial untuk menyelidiki peran androgen dalam progresivitas kanker payudara dan untuk menguji efektivitas agen terapeutik potensial yang menargetkan jalur AR. Sel-sel ini dibudidayakan dalam medium Leibovitz's L-15 yang diperkaya dengan 10% serum sapi janin, dalam kondisi yang tidak memerlukan penambahan CO₂, yang merupakan karakteristik tidak lazim dibandingkan dengan banyak garis sel lainnya. Sifat unik sel MDA-kb2 menjadikannya alat yang tak tergantikan dalam penelitian dasar maupun pengembangan farmasi, terutama dalam memahami interaksi reseptor hormon pada kanker payudara.

Tisu
Payudara, Kelenjar susu
Penyakit
Adenokarsinoma payudara
Lokasi metastasis
Efusi perikardial
Sinonim
  • MDA-Kb2

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Epitel

04Pengidentifikasi

Referensi
MDA-kb2 (nomor katalog Cytion 305108)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi protein
Baris sel tersebut mengekspresikan gen firefly-Luc yang dikendalikan oleh promotor MMTV yang mengandung elemen respons untuk reseptor glukokortikoid (GR) dan reseptor androgen (AR)

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
48 tahun