Siirry sisältöön
MDA-kb2
Kudos
Rinta, Rintarauhanen
Sairaus
Rintojen adenokarsinooma
Metastaasikohde
Perikardiaalinen effuusio
Synonyymit
MDA-Kb2

Asiakirjat

MDA-kb2

Cell line · Tuotenumero 305108

MDA-kb2-solulinja on aikuiselta potilaalta peräisin oleva ihmisen rintasyöpäsolulinja. Nämä solut ovat estrogeenireseptori (ER)-negatiivisia ja androgeenireseptori...

€430.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

MDA-kb2-solulinja on aikuispotilaasta peräisin oleva ihmisen rintasyöpäsolulinja. Nämä solut ovat estrogeenireseptori (ER)-negatiivisia ja androgeenireseptori (AR)-positiivisia, minkä vuoksi ne ovat arvokkaita tutkimuksissa, jotka käsittelevät androgeenisignalointireittejä ja niiden merkitystä rintasyövän kannalta. MDA-kb2-solulinja on johdettu rintasyöpäsolulinjasta MDA-MB-453 vakaalla transfektiolla hiiren rintasyöpäviruksen (MMTV)-Luc-neo-raportointigeenikonstruktilla. Tämä geneettinen muunnos mahdollistaa MDA-kb2-solujen käytön androgeenisten ja antiandrogeenisten toimintojen biologisissa määrityksissä, joissa niitä käytetään usein in-Luc-raportointimäärityksissä, koska ne on transfektoitu stabiilisti a-Luc-raportointigeenillä androgeenille reagoivan promoottorin ohjauksessa.

Spesifisen reseptoriprofiilinsa ansiosta MDA-kb2-solut tarjoavat tärkeän mallin androgeenien roolin tutkimiseen rintasyövän etenemisessä sekä AR-reitteihin kohdistuvien potentiaalisten terapeuttisten aineiden tehokkuuden testaamiseen. Näitä soluja viljellään Leibovitzin L-15-alustalla, johon on lisätty 10 % sikiön naudan seerumia, olosuhteissa, jotka eivät vaadi CO2-lisäystä, mikä on epätyypillinen ominaisuus verrattuna moniin muihin solulinjoihin. MDA-kb2-solujen ainutlaatuiset ominaisuudet tekevät niistä välttämättömän työkalun sekä perustutkimuksessa että lääkekehityksessä, erityisesti rintasyövän hormonireseptorien vuorovaikutusten ymmärtämisessä.

Kudos
Rinta, Rintarauhanen
Sairaus
Rintojen adenokarsinooma
Metastaasikohde
Perikardiaalinen effuusio
Synonyymit
  • MDA-Kb2

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Nainen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
MDA-kb2 (Cytionin tuotenumero 305108)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Solulinja ilmentää firefly-Luc-proteiinia MMTV-promoottorin ohjauksessa, joka sisältää sekä glukokortikoidireseptorien (GR) että androgeenireseptorien (AR) vaste-elementtejä

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
48 vuotta