Preskoči na vsebino
MDA-kb2
Tkivo
Prsi, mlečna žleza
Bolezen
Adenokarcinom dojke
Mesto metastaze
Perikardialni izliv
Sinonimi
MDA-Kb2

Dokumenti

MDA-kb2

Cell line · Številka izdelka 305108

Celična linija MDA-kb2 je človeška celična linija raka dojke, pridobljena iz odrasle pacientke. Te celice so negativne na estrogenne receptorje (ER) in androgene receptorje...

€430.00brez davka in stroškov poštnine

Prilagajanje / Priporočila

Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija MDA-kb2 je človeška celična linija raka dojke, pridobljena iz odrasle pacientke. Te celice so negativne na estrogenski receptor (ER) in pozitivne na androgenski receptor (AR), zaradi česar so dragocene za raziskave, ki obravnavajo signalne poti androgenov in njihov vpliv na raka dojke. Celična linija MDA-kb2 je bila pridobljena iz celične linije raka dojke MDA-MB-453 s stabilno transfekcijo z konstruktom poročevalskega gena mišjega virusa tumorja mlečne žleze (MMTV)-Luc-neo. Ta genska modifikacija omogoča uporabo celic MDA-kb2 v bioloških testih za androgene in antiandrogene aktivnosti, kjer se pogosto uporabljajo v testih z Luc-reporterjem zaradi njihove stabilne transfekcije z a-Luc-reporterjem pod nadzorom promotorja, ki se odziva na androgene.

Zaradi svojega specifičnega profila receptorjev celice MDA-kb2 predstavljajo ključen model za preučevanje vloge androgenov pri napredovanju raka dojke in za testiranje učinkovitosti potencialnih terapevtskih sredstev, usmerjenih v poti AR. Te celice se gojijo v Leibovitzovem L-15 mediju, dopolnjenem z 10 % fetalnim govejim serumom, v pogojih, ki ne zahtevajo dodajanja CO2, kar je neobičajna lastnost v primerjavi z mnogimi drugimi celičnimi linijami. Edinstvene lastnosti celic MDA-kb2 jih naredijo nepogrešljivo orodje tako v temeljnem raziskovanju kot v farmacevtskem razvoju, zlasti pri razumevanju interakcij hormonskih receptorjev pri raku dojke.

Tkivo
Prsi, mlečna žleza
Bolezen
Adenokarcinom dojke
Mesto metastaze
Perikardialni izliv
Sinonimi
  • MDA-Kb2

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This human breast cancer reporter cell line (MDA-kb2) contains a firefly-Luc construct delivered via lentiviral vector under a hormone-responsive promoter, enabling glucocorticoid and androgen receptor assays. The insert is stably integrated. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski

04Identifikatorji

Navajanje vira
MDA-kb2 (kataloška številka Cytion 305108)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6421

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
Celična linija izraža gen firefly-Luc pod nadzorom promotorja MMTV, ki vsebuje odzivne elemente tako za glukokortikoidne receptorje (GR) kot za androgene receptorje (AR)

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
48 let