Aller directement au contenu
MML-1
Tissu
Peau
Maladie
Mélanome
Synonymes
MML1

Documents

MML-1

Cell line · Référence du produit 300288

La lignée cellulaire MML-1 est une lignée cellulaire de mélanome issue d'un mélanome malin. Cette lignée cellulaire est principalement utilisée pour étudier la biologie du mélanome, en particulier…

€800.00hors taxes et frais de port

Personnalisation / Recommandations

En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire MML-1 est une lignée cellulaire de mélanome dérivée d'un mélanome malin. Cette lignée cellulaire est principalement utilisée pour étudier la biologie du mélanome, en particulier le rôle des vésicules extracellulaires (VE) dans la communication intercellulaire et la progression de la tumeur. Les cellules MML-1 libèrent différents sous-types de VE, notamment des exosomes, des microvésicules et des corps apoptotiques, chacun transportant des cargos d'ARN distincts, tels que des microARN (miARN) et d'autres ARN non codants.

Des études menées sur des cellules MML-1 ont démontré que les exosomes libérés par ces cellules contiennent des miARN spécifiques tels que miR-214-3p, miR-199a-3p et miR-155-5p, qui sont étroitement associés à la progression du mélanome et à la formation de métastases. Ces miARN sont enrichis dans les exosomes par rapport à d'autres types d'EV et ont été associés à d'importantes voies liées au mélanome, telles que la régulation de la voie de signalisation MAPK et les interactions avec le microenvironnement tumoral. Il est intéressant de noter que les comparaisons des profils d'ARNm des exosomes dérivés de MML-1 avec des échantillons cliniques de mélanome montrent un chevauchement significatif, ce qui indique la pertinence clinique de ce modèle cellulaire dans la compréhension de la progression du mélanome.

Outre les miARN, les cellules MML-1 libèrent également d'autres ARN non codants tels que les petits ARN nucléolaires (snoRNA) et les ARN de transfert associés aux mitochondries (mt-RNA), qui sont distribués de manière différentielle entre les sous-types d'EV. Ces résultats soulignent l'utilité de la lignée cellulaire MML-1 pour l'étude des mécanismes moléculaires du mélanome, en particulier la façon dont les cellules tumorales communiquent via les EV et influencent leur microenvironnement.

Tissu
Peau
Maladie
Mélanome
Synonymes
  • MML1

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Non précisé
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type épithélial
Tumorigène
Oui, sur des souris nues

04Identifiants

Référence
MML-1 (numéro de catalogue Cytion 300288)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6004

05Expression et sensibilité

Expression des protéines
P53 positif
Profil mutationnel
La mutation BRAF de type V600E a été déterminée par des méthodes basées sur l'ADN (séquençage, RT-PCR) et sur les protéines (Western Blot).
Transcriptase inverse
Négatif

06Manipulation et culture

Milieu de culture
RPMI 1640, w : 2.0 mM Glutamine stable, w : 2.0 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820700a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
Non spécifié