Μετάβαση στο περιεχόμενο
MML-1
Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Μελάνωμα
Συνώνυμα
MML1

Έγγραφα

MML-1

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300288

Η κυτταρική σειρά MML-1 είναι μια κυτταρική σειρά μελανώματος που προέρχεται από κακοήθες μελάνωμα. Αυτή η κυτταρική σειρά χρησιμοποιείται κυρίως για τη μελέτη της βιολογίας του μελανώματος, ιδίως της...

€800.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής

Προσαρμογή / Προτάσεις

Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά MML-1 είναι μια κυτταρική σειρά μελανώματος που προέρχεται από κακόηθες μελάνωμα. Αυτή η κυτταρική σειρά χρησιμοποιείται κυρίως για τη μελέτη της βιολογίας του μελανώματος, ιδίως του ρόλου των εξωκυτταρικών κυστιδίων (EVs) στην επικοινωνία μεταξύ κυττάρων και στην εξέλιξη του όγκου. Τα κύτταρα MML-1 απελευθερώνουν διάφορους υποτύπους EVs, συμπεριλαμβανομένων των εξωσωμάτων, των μικροκυψελίδων και των αποπτωτικών σωμάτων, καθένα από τα οποία μεταφέρει διακριτά φορτία RNA, όπως microRNAs (miRNAs) και άλλα μη κωδικοποιητικά RNAs.

Μελέτες που χρησιμοποίησαν κύτταρα MML-1 έδειξαν ότι τα εξωσώματα που απελευθερώνονται από αυτά τα κύτταρα περιέχουν συγκεκριμένα miRNAs όπως τα miR-214-3p, miR-199a-3p και miR-155-5p, τα οποία συνδέονται στενά με την εξέλιξη και τη μετάσταση του μελανώματος. Αυτά τα miRNAs είναι εμπλουτισμένα στα εξωσώματα σε σύγκριση με άλλους τύπους EV και έχουν συνδεθεί με σημαντικά μονοπάτια που σχετίζονται με το μελάνωμα, όπως η ρύθμιση του σηματοδοτικού μονοπατιού MAPK και οι αλληλεπιδράσεις του μικροπεριβάλλοντος του όγκου. Είναι ενδιαφέρον ότι οι συγκρίσεις των προφίλ miRNA από εξωσώματα που προέρχονται από το MML-1 με κλινικά δείγματα μελανώματος παρουσιάζουν σημαντική επικάλυψη, υποδεικνύοντας την κλινική σημασία αυτού του κυτταρικού μοντέλου για την κατανόηση της εξέλιξης του μελανώματος.

Εκτός από τα miRNAs, τα κύτταρα MML-1 απελευθερώνουν και άλλα μη κωδικοποιητικά RNAs, όπως μικρά πυρηνικά RNAs (snoRNAs) και μιτοχονδριακά transfer RNAs (mt-RNAs), τα οποία κατανέμονται διαφορετικά μεταξύ των υποτύπων EV. Τα ευρήματα αυτά αναδεικνύουν τη χρησιμότητα της κυτταρικής σειράς MML-1 για τη μελέτη των μοριακών μηχανισμών του μελανώματος, ιδίως του τρόπου με τον οποίο τα καρκινικά κύτταρα επικοινωνούν μέσω EVs και επηρεάζουν το μικροπεριβάλλον τους.

Ιστός
Δέρμα
Ασθένεια
Μελάνωμα
Συνώνυμα
  • MML1

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Μη καθορισμένο
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής
Ογκογόνος
Ναι, σε γυμνά ποντίκια

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
MML-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 300288)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_6004

05Έκφραση και ευαισθησία

Έκφραση πρωτεϊνών
P53 θετικό
Προφίλ μεταλλάξεων
Η μετάλλαξη BRAF τύπου V600E προσδιορίστηκε με μεθόδους που βασίζονται στο DNA (αλληλούχιση, RT-PCR) και με μεθόδους που βασίζονται στις πρωτεΐνες (Western Blot).
Αντίστροφη μεταγραφάση
Αρνητικό

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
RPMI 1640, w: 2,0 mM σταθερής γλουταμίνης, w: 2,0 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820700a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
Απροσδιόριστο