Langsung ke isi
MML-1
Tisu
Kulit
Penyakit
Melanoma
Sinonim
MML1

Dokumen

MML-1

Cell line · Nomor produk 300288

Baris sel MML-1 adalah baris sel melanoma yang berasal dari melanoma ganas. Baris sel ini terutama digunakan untuk mempelajari biologi melanoma, khususnya ...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel MML-1 adalah garis sel melanoma yang berasal dari melanoma ganas. Jalur sel ini digunakan terutama untuk mempelajari biologi melanoma, khususnya peran vesikel ekstraseluler (EV) dalam komunikasi antar sel dan perkembangan tumor. Sel MML-1 melepaskan berbagai subtipe EV, termasuk eksosom, mikrovesikel, dan badan apoptosis, yang masing-masing membawa muatan RNA yang berbeda, seperti microRNA (miRNA) dan RNA non-pengkodean lainnya.

Studi yang menggunakan sel MML-1 telah menunjukkan bahwa eksosom yang dilepaskan dari sel-sel ini mengandung miRNA spesifik seperti miR-214-3p, miR-199a-3p, dan miR-155-5p, yang terkait erat dengan perkembangan melanoma dan metastasis. MiRNA ini diperkaya dalam eksosom dibandingkan dengan jenis EV lainnya dan telah dikaitkan dengan jalur penting terkait melanoma, seperti regulasi jalur pensinyalan MAPK dan interaksi lingkungan mikro tumor. Menariknya, perbandingan profil miRNA dari eksosom yang diturunkan dari MML-1 dengan sampel klinis melanoma menunjukkan tumpang tindih yang signifikan, yang menunjukkan relevansi klinis dari model sel ini dalam memahami perkembangan melanoma.

Selain miRNA, sel MML-1 juga melepaskan RNA non-pengkodean lainnya seperti RNA nukleolar kecil (snoRNA) dan RNA transfer terkait mitokondria (mt-RNA), yang terdistribusi secara berbeda di antara subtipe EV. Temuan ini menyoroti kegunaan garis sel MML-1 dalam mempelajari mekanisme molekuler melanoma, terutama bagaimana sel tumor berkomunikasi melalui EV dan memengaruhi lingkungan mikronya.

Tisu
Kulit
Penyakit
Melanoma
Sinonim
  • MML1

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Tidak ditentukan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti epitel
Tumorigenik
Ya, pada tikus telanjang

04Pengidentifikasi

Referensi
MML-1 (Nomor katalog Cytion 300288)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6004

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi protein
P53 positif
Profil mutasi
Mutasi BRAF tipe V600E ditentukan dengan metode berbasis DNA (sekuensing, RT-PCR) dan metode berbasis protein (Western Blot).
Transkriptase balik
Negatif

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
RPMI 1640, w: 2,0 mM Glutamin stabil, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820700a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
1 x 10⁴ sel/cm²
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
Tidak ditentukan