MML-1

MML-1細胞株は悪性黒色腫由来のメラノーマ細胞株である。この細胞株は主にメラノーマの生物学、特に細胞間コミュニケーションと腫瘍の進行における細胞外小胞（EV）の役割を研究するために使用される。MML-1細胞は、エクソソーム、マイクロベシクル、アポトーシス小体など、さまざまなサブタイプのEVを放出し、それぞれがマイクロRNA（miRNA）やその他のノンコーディングRNAなど、異なるRNAカーゴを持っている。

MML-1細胞を用いた研究では、これらの細胞から放出されるエクソソームには、miR-214-3p、miR-199a-3p、miR-155-5pのような特定のmiRNAが含まれており、これらはメラノーマの進行や転移と密接に関連していることが実証されている。これらのmiRNAは、他のEVタイプと比較してエクソソームに濃縮されており、MAPKシグナル伝達経路の制御や腫瘍微小環境相互作用などの重要なメラノーマ関連経路に関連している。興味深いことに、MML-1由来のエクソソームから得られたmiRNAプロファイルをメラノーマの臨床サンプルと比較すると、有意な重複が見られ、メラノーマの進行を理解する上でこの細胞モデルが臨床的に重要であることを示している。

miRNAに加えて、MML-1細胞は、小核小体RNA（snoRNA）やミトコンドリア関連転移RNA（mt-RNA）などの他のノンコーディングRNAも放出し、これらはEVのサブタイプ間で異なって分布している。これらの知見は、メラノーマの分子メカニズム、特に腫瘍細胞がEVを介してどのように情報伝達を行い、微小環境に影響を及ぼすかを研究する上で、MML-1細胞株の有用性を浮き彫りにするものである。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。