Skip to content
MML-1
Tissue
עור
Disease
מלנומה
Synonyms
MML1

Documents

MML-1

Cell line · Product number 300288

The MML-1 cell line is a melanoma cell line derived from malignant melanoma. This cell line is used primarily to study melanoma biology, particularly the ...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
1

01General information

Description

קו התאים MML-1 הוא קו תאים של מלנומה שמקורו במלנומה ממאירה. קו תאים זה משמש בעיקר לחקר הביולוגיה של מלנומה, ובפרט לתפקיד של שלפוחיות תאיות (EVs) בתקשורת בין תאים ובהתקדמות הגידול. תאי MML-1 משחררים תת-סוגים שונים של EVs, כולל אקסוזומים, מיקרו-שלפוחיות וגופי אפופטוזיס, שכל אחד מהם נושא מטען RNA שונה, כגון microRNAs (miRNAs) ו-RNAs אחרים שאינם מקודדים.

מחקרים שבוצעו בתאי MML-1 הוכיחו כי האקסוזומים המשתחררים מתאים אלה מכילים miRNA ספציפיים כגון miR-214-3p, miR-199a-3p ו-miR-155-5p, הקשורים קשר הדוק להתקדמות המלנומה ולגרורות. MiRNAs אלה מועשרים באקסוזומים בהשוואה לסוגים אחרים של EV, והם קשורים למסלולים חשובים הקשורים למלנומה, כגון ויסות מסלול האיתות MAPK ואינטראקציות במיקרו-סביבה של הגידול. מעניין לציין כי השוואות בין פרופילי miRNA מאקסוזומים שמקורם ב-MML-1 לדגימות קליניות של מלנומה מראות חפיפה משמעותית, מה שמצביע על הרלוונטיות הקלינית של מודל תאים זה להבנת התקדמות המלנומה.

בנוסף ל-miRNAs, תאי MML-1 משחררים גם RNAs אחרים שאינם מקודדים, כגון RNAs נוקלאולריים קטנים (snoRNAs) ו-RNAs מעבירים הקשורים למיטוכונדריה (mt-RNAs), אשר מופצים באופן שונה בין תתי-סוגי ה-EV. ממצאים אלה מדגישים את התועלת של קו התאים MML-1 בחקר המנגנונים המולקולריים של מלנומה, ובפרט את האופן שבו תאי הגידול מתקשרים באמצעות EVs ומשפיעים על הסביבה המיקרוסקופית שלהם.

Tissue
עור
Disease
מלנומה
Synonyms
  • MML1

02Classification

Organism
Human
Sex
Unspecified
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי אפיתל
Tumourigenic
כן, בעכברים עירומים

04Identifiers

Citation
MML-1 (מספר קטלוגי Cytion 300288)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_6004

05Expression and susceptibility

Protein expression
P53 חיובי
Mutational profile
מוטציה מסוג V600E BRAF נקבעה באמצעות שיטות מבוססות DNA (ריצוף, RT-PCR) ושיטות מבוססות חלבון (Western Blot).
Reverse transcriptase
שלילי

06Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
לא צוין