MML-1
Cell line · Product number 300288
The MML-1 cell line is a melanoma cell line derived from malignant melanoma. This cell line is used primarily to study melanoma biology, particularly the ...
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
קו התאים MML-1 הוא קו תאים של מלנומה שמקורו במלנומה ממאירה. קו תאים זה משמש בעיקר לחקר הביולוגיה של מלנומה, ובפרט לתפקיד של שלפוחיות תאיות (EVs) בתקשורת בין תאים ובהתקדמות הגידול. תאי MML-1 משחררים תת-סוגים שונים של EVs, כולל אקסוזומים, מיקרו-שלפוחיות וגופי אפופטוזיס, שכל אחד מהם נושא מטען RNA שונה, כגון microRNAs (miRNAs) ו-RNAs אחרים שאינם מקודדים.
מחקרים שבוצעו בתאי MML-1 הוכיחו כי האקסוזומים המשתחררים מתאים אלה מכילים miRNA ספציפיים כגון miR-214-3p, miR-199a-3p ו-miR-155-5p, הקשורים קשר הדוק להתקדמות המלנומה ולגרורות. MiRNAs אלה מועשרים באקסוזומים בהשוואה לסוגים אחרים של EV, והם קשורים למסלולים חשובים הקשורים למלנומה, כגון ויסות מסלול האיתות MAPK ואינטראקציות במיקרו-סביבה של הגידול. מעניין לציין כי השוואות בין פרופילי miRNA מאקסוזומים שמקורם ב-MML-1 לדגימות קליניות של מלנומה מראות חפיפה משמעותית, מה שמצביע על הרלוונטיות הקלינית של מודל תאים זה להבנת התקדמות המלנומה.
בנוסף ל-miRNAs, תאי MML-1 משחררים גם RNAs אחרים שאינם מקודדים, כגון RNAs נוקלאולריים קטנים (snoRNAs) ו-RNAs מעבירים הקשורים למיטוכונדריה (mt-RNAs), אשר מופצים באופן שונה בין תתי-סוגי ה-EV. ממצאים אלה מדגישים את התועלת של קו התאים MML-1 בחקר המנגנונים המולקולריים של מלנומה, ובפרט את האופן שבו תאי הגידול מתקשרים באמצעות EVs ומשפיעים על הסביבה המיקרוסקופית שלהם.
- Tissue
- עור
- Disease
- מלנומה
- Synonyms
- MML1
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Unspecified
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- דמוי אפיתל
- Tumourigenic
- כן, בעכברים עירומים
04Identifiers
- Citation
- MML-1 (מספר קטלוגי Cytion 300288)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6004
05Expression and susceptibility
- Protein expression
- P53 חיובי
- Mutational profile
- מוטציה מסוג V600E BRAF נקבעה באמצעות שיטות מבוססות DNA (ריצוף, RT-PCR) ושיטות מבוססות חלבון (Western Blot).
- Reverse transcriptase
- שלילי
06Handling and culture
- Culture medium
- RPMI 1640, w: 2.0 mM גלוטמין יציב, w: 2.0 g/L NaHCO3 (מספר קטלוגי של Cytion 820700a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO2, אווירה לחה.
- Supplements
- הוסף לתווך 10% FBS
- Dissociation reagent
- אקוטאז
- Subculturing
- הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
- Seeding density
- 1 x 104 תאים/סמ"ר
- Fluid renewal
- 2 עד 3 פעמים בשבוע
- Post-thaw recovery
- לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.
כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.
- Freeze medium
- כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
- Storage conditions
לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.
- Shipping conditions
שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.
08Donor
- Donor age
- לא צוין
09Legal and safety
- Safety precautions
- כאשר מתכננים לאחסן קריוביאל בחנקן נוזלי להפשרה עתידית, חובה להקפיד על אמצעי בטיחות מחמירים. יש להקפיד על שימוש בכפפות ובבגדים מגנים מתאימים, וכן על שימוש במסכת פנים או משקפי מגן בעת העברת דגימות קפואות אל מיכל החנקן הנוזלי או ממנו. זאת כדי להפחית את הסיכון לפציעה כתוצאה מפיצוץ אפשרי של הקריוביאל בעת הוצאתו, העלול לגרום להתזת רסיסים חדים.
- Warranty
ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.
לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו
- Material Transfer Agreement required
- Yes