Preskoči na vsebino
MML-1
Tkivo
Koža
Bolezen
Melanom
Sinonimi
MML1

Dokumenti

MML-1

Cell line · Številka izdelka 300288

Celična linija MML-1 je celična linija melanoma, pridobljena iz malignega melanoma. Ta celična linija se uporablja predvsem za raziskovanje biologije melanoma, zlasti ...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija MML-1 je melanomska celična linija, pridobljena iz malignega melanoma. Ta celična linija se uporablja predvsem za preučevanje biologije melanoma, zlasti vloge zunajceličnih veziklov (EV) pri komunikaciji med celicami in napredovanju tumorja. Celice MML-1 sproščajo različne podtipe EV, vključno z eksosomi, mikrovezikuli in apoptotskimi telesi, ki nosijo različne RNA-naprave, kot so mikroRNA (miRNA) in druge nekodirajoče RNA.

Študije z uporabo celic MML-1 so pokazale, da eksosomi, ki se sproščajo iz teh celic, vsebujejo posebne miRNA, kot so miR-214-3p, miR-199a-3p in miR-155-5p, ki so tesno povezane z napredovanjem melanoma in metastaziranjem. Te miRNA so v primerjavi z drugimi vrstami EV obogatene v eksosomih in so povezane s pomembnimi potmi, povezanimi z melanomom, kot so regulacija signalne poti MAPK in interakcije med tumorskim mikrookoljem. Zanimivo je, da primerjave profilov miRNA iz eksosomov, pridobljenih iz MML-1, s kliničnimi vzorci melanoma kažejo znatno prekrivanje, kar kaže na klinični pomen tega celičnega modela pri razumevanju napredovanja melanoma.

Poleg miRNA celice MML-1 sproščajo tudi druge nekodirajoče RNA, kot so majhne nukleolarne RNA (snoRNA) in z mitohondriji povezane prenosne RNA (mt-RNA), ki so različno razporejene med podtipi EV. Te ugotovitve poudarjajo uporabnost celične linije MML-1 pri preučevanju molekularnih mehanizmov melanoma, zlasti tega, kako tumorske celice komunicirajo prek EV in vplivajo na svoje mikrookolje.

Tkivo
Koža
Bolezen
Melanom
Sinonimi
  • MML1

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ni navedeno
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Tumorigeničen
Da, na golih miših

04Identifikatorji

Navajanje vira
MML-1 (kataloška številka Cytion 300288)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6004

05Izražanje in dovzetnost

Ekspresija beljakovin
P53 pozitiven
Profil mutacij
Mutacijo BRAF tipa V600E so določili z metodami, ki temeljijo na DNK (sekvenciranje, RT-PCR), in metodami, ki temeljijo na beljakovinah (Western Blot).
Reversna transkriptaza
Negativni

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilnega glutamina, w: 2,0 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820700a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
Neopredeljeno