Gå direkte til indholdet
MML-1
Væv
Hud
Sygdom
Modermærkekræft
Synonymer
MML1

Dokumenter

MML-1

Cell line · Varenummer 300288

MML-1-cellelinjen er en melanomcellelinje, der stammer fra et malignt melanom. Denne cellelinje anvendes primært til at undersøge melanomets biologi, især …

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

MML-1-cellelinjen er en melanomcellelinje, der stammer fra malignt melanom. Denne cellelinje bruges primært til at studere melanomets biologi, især den rolle, som ekstracellulære vesikler (EV'er) spiller i celle-til-celle-kommunikation og tumorprogression. MML-1-celler frigiver forskellige undertyper af EV'er, herunder exosomer, mikrovesikler og apoptotiske legemer, som hver især bærer forskellige RNA-kargoer, såsom mikroRNA'er (miRNA'er) og andre ikke-kodende RNA'er.

Undersøgelser med MML-1-celler har vist, at exosomer frigivet fra disse celler indeholder specifikke miRNA'er som miR-214-3p, miR-199a-3p og miR-155-5p, som er tæt forbundet med melanomprogression og metastase. Disse miRNA'er er beriget i exosomer sammenlignet med andre EV-typer og er blevet forbundet med vigtige melanomrelaterede veje, såsom regulering af MAPK-signalvejen og interaktioner med tumormikromiljøet. Interessant nok viser sammenligninger af miRNA-profiler fra MML-1-afledte exosomer med kliniske prøver af melanom et betydeligt overlap, hvilket indikerer den kliniske relevans af denne cellemodel i forståelsen af melanomprogression.

Ud over miRNA'er frigiver MML-1-celler også andre ikke-kodende RNA'er såsom små nukleolære RNA'er (snoRNA'er) og mitokondrie-associerede transfer-RNA'er (mt-RNA'er), som er forskelligt fordelt mellem EV-undertyperne. Disse resultater fremhæver MML-1-cellelinjens anvendelighed til at studere de molekylære mekanismer i melanom, især hvordan tumorceller kommunikerer via EV'er og påvirker deres mikromiljø.

Væv
Hud
Sygdom
Modermærkekræft
Synonymer
  • MML1

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Uspecificeret
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i nøgne mus

04Identifikatorer

Kildehenvisning
MML-1 (Cytion katalognummer 300288)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6004

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
P53-positiv
Mutationsprofil
V600E-type BRAF-mutation blev bestemt ved hjælp af DNA-baserede metoder (sekventering, RT-PCR) og proteinbaserede metoder (Western Blot).
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
Uspecificeret