MML-1

A linha de células MML-1 é uma linha de células de melanoma derivada de melanoma maligno. Esta linha celular é utilizada principalmente para estudar a biologia do melanoma, em particular o papel das vesículas extracelulares (EVs) na comunicação célula-a-célula e na progressão do tumor. As células MML-1 libertam vários subtipos de EVs, incluindo exossomas, microvesículas e corpos apoptóticos, cada um transportando cargas de RNA distintas, como microRNAs (miRNAs) e outros RNAs não codificantes.

Estudos realizados com células MML-1 demonstraram que os exossomas libertados por estas células contêm miRNAs específicos, como o miR-214-3p, o miR-199a-3p e o miR-155-5p, que estão intimamente associados à progressão e metástase do melanoma. Estes miRNAs são enriquecidos em exossomas em comparação com outros tipos de EV e têm sido associados a importantes vias relacionadas com o melanoma, tais como a regulação da via de sinalização MAPK e as interações do microambiente tumoral. Curiosamente, as comparações dos perfis de miRNA dos exossomas derivados de MML-1 com amostras clínicas de melanoma mostram uma sobreposição significativa, indicando a relevância clínica deste modelo celular na compreensão da progressão do melanoma.

Para além dos miRNAs, as células MML-1 também libertam outros RNAs não codificantes, tais como pequenos RNAs nucleolares (snoRNAs) e RNAs de transferência associados a mitocôndrias (mt-RNAs), que se distribuem diferencialmente entre os subtipos de EV. Estas descobertas realçam a utilidade da linha celular MML-1 no estudo dos mecanismos moleculares do melanoma, em particular a forma como as células tumorais comunicam através de EVs e influenciam o seu microambiente.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia