MML-1
Cell line · Termékszám 300288
Az MML-1 sejtvonal egy rosszindulatú melanómából származó melanóma-sejtvonal. Ezt a sejtvonalat elsősorban a melanóma biológiájának, különösen a …
Személyre szabás / Ajánlások
- MML-1Cell line€800.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
Az MML-1 sejtvonal egy rosszindulatú melanomából származó melanoma sejtvonal. Ezt a sejtvonalat elsősorban a melanoma biológiájának tanulmányozására használják, különös tekintettel az extracelluláris vezikulák (EV-k) szerepére a sejtek közötti kommunikációban és a tumor progressziójában. Az MML-1 sejtek az EV-k különböző altípusait bocsátják ki, beleértve az exoszómákat, mikrovezikulákat és apoptotikus testeket, amelyek mindegyike különböző RNS-anyagokat, például mikroRNS-eket (miRNS-eket) és más nem kódoló RNS-eket hordoz.
MML-1 sejtekkel végzett vizsgálatok kimutatták, hogy az e sejtekből felszabaduló exoszómák olyan specifikus miRNS-eket tartalmaznak, mint a miR-214-3p, a miR-199a-3p és a miR-155-5p, amelyek szoros kapcsolatban állnak a melanoma progressziójával és metasztázisával. Ezek a miRNS-ek más EV-típusokhoz képest az exoszómákban gazdagodnak, és olyan fontos melanomával kapcsolatos útvonalakhoz kapcsolódnak, mint a MAPK jelátviteli útvonal szabályozása és a tumoros mikrokörnyezet kölcsönhatásai. Érdekes módon az MML-1-ből származó exoszómákból származó miRNS-profilok és a melanoma klinikai mintáinak összehasonlítása jelentős átfedést mutat, ami jelzi e sejtmodell klinikai jelentőségét a melanoma progressziójának megértésében.
A miRNS-ek mellett az MML-1 sejtek más nem kódoló RNS-eket is felszabadítanak, mint például a kis nukleoláris RNS-ek (snoRNS-ek) és a mitokondriumokhoz kapcsolódó transzfer RNS-ek (mt-RNS-ek), amelyek differenciáltan oszlanak el az EV altípusok között. Ezek az eredmények rávilágítanak az MML-1 sejtvonal hasznosságára a melanoma molekuláris mechanizmusainak tanulmányozásában, különösen arra, hogy a tumorsejtek hogyan kommunikálnak az EV-ken keresztül és hogyan befolyásolják mikrokörnyezetüket.
- Szövet
- Bőr
- Betegség
- Melanoma
- Szinonimák
- MML1
02Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Szex
- Nem meghatározott
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelszerű
- Daganatképző
- Igen, meztelen egerekben
04Azonosítók
- Hivatkozás
- MML-1 (Cytion katalógusszám: 300288)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6004
05Kifejeződés és fogékonyság
- Fehérjeexpresszió
- P53 pozitív
- Mutációs profil
- A V600E típusú BRAF-mutációt DNS-alapú módszerekkel (szekvenálás, RT-PCR) és fehérjealapú módszerekkel (Western Blot) határozták meg.
- Fordított transzkriptáz
- Negatív
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabil glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion 820700a cikkszám)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Ültetési sűrűség
- 1 x 104 sejt/cm2
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Az olvadás utáni helyreállás
- Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Az adományozó életkora
- Meghatározatlan
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen