MML-1

La linea cellulare MML-1 è una linea cellulare derivata da melanoma maligno. Questa linea cellulare è utilizzata principalmente per studiare la biologia del melanoma, in particolare il ruolo delle vescicole extracellulari (EVs) nella comunicazione cellula-cellula e nella progressione tumorale. Le cellule MML-1 rilasciano vari sottotipi di EVs, tra cui esosomi, microvescicole e corpi apoptotici, ognuno dei quali trasporta cargos di RNA distinti, come microRNA (miRNA) e altri RNA non codificanti.

Studi condotti su cellule MML-1 hanno dimostrato che gli esosomi rilasciati da queste cellule contengono miRNA specifici come miR-214-3p, miR-199a-3p e miR-155-5p, strettamente associati alla progressione del melanoma e alle metastasi. Questi miRNA sono arricchiti negli esosomi rispetto ad altri tipi di EV e sono stati collegati a importanti percorsi legati al melanoma, come la regolazione della via di segnalazione MAPK e le interazioni con il microambiente tumorale. È interessante notare che il confronto dei profili di miRNA degli esosomi derivati da MML-1 con campioni clinici di melanoma mostra una significativa sovrapposizione, indicando la rilevanza clinica di questo modello cellulare nella comprensione della progressione del melanoma.

Oltre ai miRNA, le cellule MML-1 rilasciano anche altri RNA non codificanti, come i piccoli RNA nucleolari (snoRNA) e gli RNA di trasferimento associati ai mitocondri (mt-RNA), che sono distribuiti in modo differenziato tra i sottotipi di EV. Questi risultati evidenziano l'utilità della linea cellulare MML-1 per lo studio dei meccanismi molecolari del melanoma, in particolare di come le cellule tumorali comunicano attraverso le EV e influenzano il loro microambiente.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia